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Fluo 4-AM
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產(chǎn)品英文名稱(chēng):Fluo 4-AM
產(chǎn)品中文名稱(chēng):Fluo 4-AM 鈣離子熒光探針
Fluo 4-AM 鈣離子熒光探針產(chǎn)品簡(jiǎn)介
• 分 子 式: C51H50F2N2O23
• 分 子 量: 1096.94
• 外 觀: 橙紅色粉末
• 別 名: Fluo 4-AM
• 純 度: 98%以上(HPLC)
• 儲(chǔ)存條件: -20℃
• 運(yùn)輸條件: 室溫
Fluo 4-AM 鈣離子熒光探針產(chǎn)品特性
Fluo 4是一種將Fluo 3結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強(qiáng)的F,它的最大激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)向短波長(zhǎng)處偏離10 nm左右。這個(gè)波長(zhǎng)更接近于氬激光器的波長(zhǎng),所以用氬激光器激發(fā)時(shí),F(xiàn)luo 4的熒光強(qiáng)度比Fluo 3強(qiáng)1倍。
由于Fluo 4與鈣離子的親和力和Fluo 3近似(Fluo 3:Kd=0.4 μmol/l、Fluo 4: Kd=0.36 μmol/l),所以使用上和Fluo 3也基本相同,可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀等儀器檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
Fluo 4-AM是Fluo 4的一種乙酰甲酯衍生物,通過(guò)培養(yǎng),能夠輕易進(jìn)入細(xì)胞中。AM進(jìn)入細(xì)胞后會(huì)被胞內(nèi)酯酶所水解,產(chǎn)生的Fluo 4隨后會(huì)和鈣離子(Ca2+)結(jié)合并發(fā)出熒光。鈣離子探針、胞內(nèi)熒光探針的種類(lèi)繁多,根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求,實(shí)驗(yàn)者的選擇性有很多。
Fluo 4-AM (鈣離子熒光探針) 需用無(wú)水DMSO (anhydrous DMSO)配制。Fluo 4-AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo 4-AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo 4,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。
Fluo 4-AM 鈣離子熒光探針使用注意事項(xiàng)
1.試劑容易吸潮,從冰箱取出后,請(qǐng)確認(rèn)在干燥的環(huán)境放至室溫后再開(kāi)封。由于試劑極其微量,開(kāi)封前,請(qǐng)輕彈管壁幾次,以保證粉末落入管底。
2.第一次使用時(shí),建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時(shí)間內(nèi)使用,以保證實(shí)驗(yàn)效果。
3.溶解液DMSO需要保證新鮮無(wú)水,否則將會(huì)導(dǎo)致AM體水解,使熒光染料無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞,影響實(shí)驗(yàn)效果。
4.母液遇水極易分解,如果不能一次用完,建議分裝保存,例如分裝成5 μl/管,用封口膜封口,并用鋁箔紙包裹,放在一個(gè)密閉性能好的塑料袋中,并放入一包干燥劑,在≤-20℃密封避光保存。
5.建議您在正式實(shí)驗(yàn)前先摸索一下細(xì)胞量、鈣離子熒光探針的終濃度、培養(yǎng)時(shí)間等,找到最佳實(shí)驗(yàn)條件。
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