英文名稱：In Situ Cell Death Detection Kit, AP
中文名稱：原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒, AP

原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒, AP 產(chǎn)品介紹：
原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒廣泛應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡，包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。細(xì)胞凋亡早期標(biāo)志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA斷裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標(biāo)記的修飾核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP）在酶促反應(yīng)中檢測(cè)到。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）催化脫氧核糖核苷酸獨(dú)立聚合為以3’-端結(jié)尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為T(mén)UNEL （TdT介導(dǎo)的dUTP-X 缺口末端標(biāo)記）。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標(biāo)記（模板依賴型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更靈敏快速。

檢測(cè)原理：原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒基于對(duì)細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測(cè)。凋亡細(xì)胞被固定和滲透。隨后，這些細(xì)胞和TUNEL反應(yīng)混合物（包含TdT和熒光素-dUTP）一起孵育。孵育期間，TdT催化熒光素-dUTP標(biāo)記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后，標(biāo)記物包含在DNA斷裂位點(diǎn)處，并被抗熒光素抗體結(jié)合物識(shí)別標(biāo)記（報(bào)告酶堿性磷酸酶）。清洗去除未結(jié)合的酶配體，AP保留在免疫復(fù)合物中，可通過(guò)底物反應(yīng)觀察到。

樣本材料：細(xì)胞離心涂片器和細(xì)胞涂片制備，載玻片上生長(zhǎng)的貼壁細(xì)胞，冷凍和蠟包被的組織切片

產(chǎn)品特點(diǎn)：
靈敏：最大凋亡細(xì)胞標(biāo)記強(qiáng)度（細(xì)胞染色），比缺口平移要高
快速：熒光素-dUTP標(biāo)記使其在TUNEL反應(yīng)結(jié)束后直接可進(jìn)行樣本分析（2-3 h）
方便：使用熒光素d-UTP直接標(biāo)記法可在檢測(cè)時(shí)確認(rèn)TUNEL反應(yīng)效率
準(zhǔn)確：可在分子水平（DNA鏈斷裂）鑒定極早期凋亡細(xì)胞
靈活：不包含底物；可選擇不同染色方法

產(chǎn)品成份：
• 酶溶液（TdT）
• 標(biāo)記溶液（熒光素-dUTP）
• 媒介物AP（抗-熒光素抗體-AP），即開(kāi)可用