產品英文名稱：CHO HCP ELISA kit, 3G
產品中文名稱：CHO HCP酶聯(lián)免疫分析試劑盒

CHO HCP ELISA 試劑盒 產品介紹：
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒，比之前試劑盒具有更廣泛HCP反應性。新型試劑盒在檢測CHO HCPs 蛋白方面有很多改進。新試劑盒具有更高的靈敏度，在抗體物和其它CHO表達蛋白中檢測HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經過大量藥物原料和中試樣品檢測評估，是工藝開發(fā)和大量釋放試驗檢測的通用方法?？贵w反應性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術（2D HPLC-ELISA）鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對超過750種HCPs都具有反應性。用蛋白檢測方法和ELISA正交試驗表明這些多達750種的宿主細胞蛋白意味著高于98%的蛋白種類均可用ELISA方法檢測到。因此，這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。

產品使用時一定要做好保護措施：0.5M硫磺酸有強腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。

§檢測原理：CHO檢測是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標記有抗-CHO抗體的辣根過氧化物酶同時反應，反應發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反應構成為夾層式結構：固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應結束后清洗微量滴定板去除未結合反應物。添加TMB作用底物反應。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線，根據讀數(shù)可以計算出CHO HCPs蛋白含量。

§檢測過程：取出所有試劑平衡到室溫→移取100μl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50μl標準液，對照物和樣品至待測孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)

§結果分析：標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數(shù)據分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光值，X軸標注濃度。然后根據樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標準液都要重復滴定到兩個小孔中，以便計算平均分光光度值，樣品也需計算平均吸光值）。

CHO HCP ELISA組成成份：
● Anti-CHO:HRP(辣根過氧化物酶)　? 　　　????? 1x12mL?? F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板　????????? 　　　?????????????? 12×8孔　? F552
● CHO HCP標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)??? 1mL/瓶　 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸)? 　　　??????1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)　???????????????????? ?1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)　??????????? 1x50mL?? F004

需自備物：
? 微量板分光光度計，雙波長450 & 650nm
? 移液器-50L and 100L
? 可重復使用或多通道移液器-100L
? 微量板搖床（150 – 200 rpm）
? 樣品稀釋液（推薦使用Cat # I028）
? 1L清洗瓶
? 蒸餾水