一般描述

NeuN抗體(神經(jīng)元核；克隆A60)可特異性地識(shí)別DNA結(jié)合的神經(jīng)元特異性蛋白NeuN，它存在于所有被測(cè)脊椎動(dòng)物的大多數(shù)CNS和PNS神經(jīng)元細(xì)胞中。NeuN蛋白的分布明顯局限于胎兒和成人大腦中的神經(jīng)元細(xì)胞核、核周體和一些近端神經(jīng)元突起，但有些神經(jīng)元在所有年齡段都不能被NeuN識(shí)別:例如，INL視網(wǎng)膜細(xì)胞、Cajal Retzius細(xì)胞、Purkinje細(xì)胞、下橄欖核和齒狀核神經(jīng)元以及交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Mullen等人，1992；Wolf等人，1996)。免疫組化檢測(cè)的NeuN蛋白首先出現(xiàn)在神經(jīng)元從細(xì)胞周期中退出和/或與神經(jīng)元終末分化開(kāi)始所對(duì)應(yīng)的發(fā)育時(shí)間點(diǎn)(Mullen等人，1992)。免疫反應(yīng)性出現(xiàn)在小鼠神經(jīng)管中的E9.5附近，廣泛存在于發(fā)育中的神經(jīng)系統(tǒng)中。強(qiáng)核染色代表核調(diào)節(jié)蛋白的功能；但是，目前還沒(méi)有證據(jù)表明NeuN蛋白抗原在遠(yuǎn)端細(xì)胞質(zhì)中是否有功能，或者它是否只是在轉(zhuǎn)運(yùn)回細(xì)胞核之前在遠(yuǎn)端細(xì)胞質(zhì)中合成的。從純化的細(xì)胞核中分離出的蛋白質(zhì)與免疫印跡上的全腦提取物之間沒(méi)有差異(Mullen等人，1992)。

特異性

MILLIPORE針對(duì)脊椎動(dòng)物神經(jīng)元特異性核蛋白NeuN(或神經(jīng)元核)的獨(dú)有單克隆抗體可與小鼠整個(gè)神經(jīng)系統(tǒng)的大多數(shù)神經(jīng)元細(xì)胞類型反應(yīng)，如小腦、大腦皮層、海馬、丘腦、脊髓、包括背根神經(jīng)節(jié)、交感神經(jīng)鏈神經(jīng)節(jié)和腸神經(jīng)節(jié)在內(nèi)的外周神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元?！湓诎l(fā)育過(guò)程中，首先在神經(jīng)元發(fā)生有絲分裂后不久觀察到免疫反應(yīng)性，在增生區(qū)未觀察到染色。免疫組化染色主要位于神經(jīng)元的細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)染色較淺。少數(shù)不與MAB377反應(yīng)的細(xì)胞類型包括浦肯野細(xì)胞、二尖瓣細(xì)胞和感光細(xì)胞。該抗體是原代培養(yǎng)和視黃酸刺激的P19細(xì)胞的極(jí)佳神經(jīng)元標(biāo)記物。它還可用于識(shí)別移植物中的神經(jīng)元。

免疫原:純化小鼠腦細(xì)胞核

應(yīng)用

抗NeuN抗體，克隆A60可檢測(cè)NeuN水平，已發(fā)表并經(jīng)驗(yàn)證可用于FC、IC、IF、IH、IH(P)、IP和WB。
研究子類別
神經(jīng) & 膠質(zhì)標(biāo)記
研究類別
神經(jīng)科學(xué)
蛋白質(zhì)印跡分析：
前一批抗體在46-48 kDa范圍內(nèi)識(shí)別出2-3個(gè)條帶，可能在66 kDa左右識(shí)別出另一條帶。

免疫細(xì)胞化學(xué):使用先前批次的1:10-1:100稀釋液。培養(yǎng)的神經(jīng)元應(yīng)使用0.1％ Triton X-100滲透。所應(yīng)使用僅含有緩沖液和一抗、不含多余蛋白塊或洗滌劑的簡(jiǎn)單溶液對(duì)一抗進(jìn)行稀釋。

免疫組化:1:100-1:1000。該抗體在聚酯蠟包埋組織上效果最好，但也能以較低的工作稀釋度在石蠟包埋組織上發(fā)揮作用。該抗體可與甲醛固定劑很好地結(jié)合。成功應(yīng)用了檸檬酸和微波預(yù)處理(Sarnat，1998)。

免疫組化(石蠟)分析:前一批用于IH(P)。

最佳工作稀釋度必須由最終用戶確定。

質(zhì)量

采用免疫組化法對(duì)腦組織進(jìn)行常規(guī)評(píng)估。

免疫組化(石蠟)分析:用pH 6.0的檸檬酸鹽預(yù)處理的組織。使用帶有HRP-DAB的IHC-Select Detection將這批抗體稀釋至1:100。 免疫反應(yīng)性表現(xiàn)為顆粒層神經(jīng)元的核染色。要注意的是，在浦肯野細(xì)胞的細(xì)胞核中沒(méi)有檢測(cè)到信號(hào)。pH 6.0的檸檬酸鹽緩沖液的最佳染色，抗原表位檢索:大鼠小腦

目標(biāo)描述:46/48 kDa

外形

形式：純化
純化小鼠免疫球蛋白IgG1的緩沖液溶液，含有0.02 M 磷酸鹽緩沖液、0.25 M NaCl和0.1%疊(dié)(dàn)化(huà)(nà)鈉，pH 7.4。
純化的蛋白 A

儲(chǔ)存及穩(wěn)定性:自收到之日起在2-8oC可穩(wěn)定保存6個(gè)月。

分析說(shuō)明

對(duì)照
陽(yáng)性對(duì)照 – 腦組織。陰性對(duì)照 – 任何非神經(jīng)元組織，例如成纖維細(xì)胞

其他說(shuō)明:濃度:請(qǐng)參考批次特異性濃縮物的分析證書(shū)。

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