在中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究中,如何特異性地識(shí)別和標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞,是理解神經(jīng)發(fā)育、損傷修復(fù)及神經(jīng)退行性疾病機(jī)制的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)作為星形膠質(zhì)細(xì)胞最主要的中間絲蛋白,是區(qū)分分化星形膠質(zhì)細(xì)胞與其他膠質(zhì)細(xì)胞的核心標(biāo)志物。Merck-millipore 的 MAB360 抗GFAP抗體(克隆號(hào) GA5),正是這一領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛、驗(yàn)證最充分的經(jīng)典工具之一。
一、產(chǎn)品概述
MAB360 是 Chemicon? 品牌旗下的一款小鼠單克隆抗GFAP抗體,克隆號(hào)為 GA5,以腹水液形式提供。該抗體可識(shí)別多種屬(包括人、大鼠、小鼠、兔、雞、豬、牛)的GFAP蛋白,適用于免疫細(xì)胞化學(xué)(IC)、免疫組織化學(xué)(IHC)、石蠟包埋組織免疫組化(IH(P))以及Western Blot(WB)等多種實(shí)驗(yàn)技術(shù),已在神經(jīng)科學(xué)研究中被大量文獻(xiàn)引用和驗(yàn)證。
該產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人體或診斷用途。
二、核心參數(shù)
參數(shù) 規(guī)格
產(chǎn)品貨號(hào) MAB360
產(chǎn)品名稱 Anti-Glial Fibrillary Acidic Protein Antibody, clone GA5
品牌 Merck-millipore(Chemicon?)
克隆號(hào) GA5
宿主 小鼠
抗體類型 單克隆抗體
免疫球蛋白亞型 IgG1
抗體形式 腹水液
免疫原 純化的豬脊髓來源GFAP
分子量 ~51 kDa
種屬反應(yīng)性 牛、雞、人、小鼠、豬、兔、大鼠
應(yīng)用 IC、IHC、IH(P)、WB
儲(chǔ)存溫度 -20°C
運(yùn)輸條件 常溫運(yùn)輸
RRID AB_11212597
三、靶點(diǎn)概述:GFAP的生物學(xué)功能
GFAP 是一種 III 類中間絲蛋白,是星形膠質(zhì)細(xì)胞中間絲的主要組成成分。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中,GFAP 作為細(xì)胞特異性標(biāo)記,可將分化的星形膠質(zhì)細(xì)胞與其他膠質(zhì)細(xì)胞區(qū)分開來。
在免疫組織化學(xué)應(yīng)用中,MAB360 可特異性識(shí)別星形膠質(zhì)細(xì)胞和 Bergmann 膠質(zhì)細(xì)胞,以及神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞來源的腫瘤。值得注意的是,該抗體與波形蛋白(vimentin)無交叉反應(yīng),這對(duì)于需要精確區(qū)分星形膠質(zhì)細(xì)胞與其他中間絲表達(dá)細(xì)胞的研究尤為重要。
四、技術(shù)驗(yàn)證與數(shù)據(jù)
Western Blot 驗(yàn)證
在來自人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系(U33CG/343MG)提取物的 Western Blot 中,MAB360 可識(shí)別到一條約 51 kDa 的條帶,與 GFAP 的理論分子量一致。該抗體在質(zhì)量控制中通過小鼠腦裂解液進(jìn)行常規(guī)評(píng)估,1:1000 稀釋度可檢測(cè) 10 μg 小鼠腦裂解液中的 GFAP。
免疫組化驗(yàn)證
在石蠟包埋組織切片中,該抗體以 1:400-1:800 的稀釋度成功用于酒精固定的大鼠腦(大腦或小腦)和人腦切片,呈現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和 Bergmann 膠質(zhì)細(xì)胞的清晰染色。
文獻(xiàn)應(yīng)用
該抗體已在大量神經(jīng)科學(xué)研究中應(yīng)用,覆蓋星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)退行性疾病、腦損傷與修復(fù)、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等多個(gè)方向,是 GFAP 檢測(cè)領(lǐng)域具有代表性的經(jīng)典克隆之一。
五、適用研究領(lǐng)域
MAB360 抗GFAP抗體適用于以下研究方向:
星形膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué):星形膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定、形態(tài)學(xué)分析和發(fā)育研究
神經(jīng)發(fā)育研究:中樞神經(jīng)系統(tǒng)中星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化與成熟
神經(jīng)退行性疾?。喊柎暮D?、帕金森病等疾病中反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞增生研究
腦損傷與修復(fù):創(chuàng)傷性腦損傷、缺血性腦卒中后的膠質(zhì)瘢痕形成
神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究:膠質(zhì)瘤和膠質(zhì)細(xì)胞來源腫瘤的標(biāo)記與鑒定
脊髓與視網(wǎng)膜研究:脊髓和視網(wǎng)膜中 Müller 膠質(zhì)細(xì)胞等 GFAP 陽性細(xì)胞的研究
多發(fā)性硬化與脫髓鞘模型:cuprizone 等動(dòng)物模型中星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)的評(píng)估
六、使用說明
儲(chǔ)存與處理:
收到產(chǎn)品后,在移除管蓋前先離心小瓶并輕輕混勻溶液
分裝至微量離心管中,于 -20°C 儲(chǔ)存
自收到之日起,-20°C 條件下可穩(wěn)定保存 1 年
避免反復(fù)凍融,以免損傷 IgG 并影響產(chǎn)品性能
推薦工作稀釋度:
應(yīng)用 推薦稀釋度
免疫細(xì)胞化學(xué)(IC) 適用于培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞
免疫組化(石蠟切片) 1:400 – 1:800(酒精固定的大鼠腦/人腦切片)
Western Blot 1:1000(小鼠腦裂解液)
最佳工作稀釋度需由最終用戶根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化確定。
陽性對(duì)照:培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞、腦組織(白質(zhì))、脊髓、視網(wǎng)膜。
七、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
? 經(jīng)典克隆,廣泛驗(yàn)證
克隆號(hào) GA5 是 GFAP 抗體領(lǐng)域最為經(jīng)典的克隆之一,自報(bào)道以來已在大量研究中得到驗(yàn)證,具有穩(wěn)定的特異性和重復(fù)性。
? 種屬覆蓋廣泛
可識(shí)別人、大鼠、小鼠、兔、雞、豬、牛等多種屬的 GFAP,為跨物種比較研究提供了便利。
? 無波形蛋白交叉反應(yīng)
與波形蛋白無交叉反應(yīng),確保了星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記的特異性,避免了對(duì)其他中間絲表達(dá)細(xì)胞的誤判。
? 多平臺(tái)兼容
同時(shí)適用于免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)(包括石蠟切片)和 Western Blot,可滿足不同實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的需求。
MAB360 抗GFAP抗體以其經(jīng)典克隆 GA5 的卓越特異性、廣泛的種屬覆蓋和豐富的文獻(xiàn)驗(yàn)證,成為神經(jīng)科學(xué)研究中星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記的可靠選擇。無論是基礎(chǔ)的星形膠質(zhì)細(xì)胞鑒定,還是復(fù)雜的神經(jīng)退行性疾病模型研究,這款抗體都能為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性提供堅(jiān)實(shí)保障。
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