Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate
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產(chǎn)品簡介:
轉(zhuǎn)錄因子固定/滲透溶液可以與相關(guān)抗體一起染色轉(zhuǎn)錄因子,如Foxp3,以及細(xì)胞因子、趨化因子和核蛋白的核內(nèi)染色。濃縮液應(yīng)與轉(zhuǎn)錄因子固定/滲透稀釋和滲透緩沖液一起使用。
產(chǎn)品使用說明:
一)應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測臨床全血標(biāo)本細(xì)胞內(nèi)多項免疫學(xué)指標(biāo)
肝素鈉抗凝的全血樣本,室溫存放,在24 小時內(nèi)使用。
1. 取抗凝血50ul 放入流式管中。
2. 加入檢測細(xì)胞表面分子用的熒光素標(biāo)記抗體,混和均勻,室溫避光孵育20 分鐘 。
3. 加入1ml 溶血素,振蕩均勻,室溫放置20 分鐘,離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
4. 用1ml PBS 重懸洗滌細(xì)胞,離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
5. 加入300ul 固定/ 破膜劑,振蕩均勻,室溫放置20 分鐘。離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
6. 加入胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測用熒光素標(biāo)記抗體,混和均勻,室溫避光孵育20 分鐘 。
7. 用1ml PBS 重懸洗滌細(xì)胞,離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
8. 上機(jī)分析。
(二)應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測外周血PBMC 的細(xì)胞內(nèi)多項免疫學(xué)指標(biāo)
1. 使用淋巴細(xì)胞分離液分離外周血樣本,獲得新鮮PBMC(外周血單個核細(xì)胞)后,取1X106的細(xì)胞放入流式管中。
2. 加入檢測細(xì)胞表面分子用的熒光素標(biāo)記抗體,混和均勻,室溫避光孵育20 分鐘 。
3. 加入300ul 固定/ 破膜劑,振蕩均勻,室溫放置20 分鐘。離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
4. 加入檢測細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子用的熒光素標(biāo)記抗體,混和均勻,室溫避光孵育20 分鐘 。
5. 用1ml PBS 重懸洗滌細(xì)胞,離心(300g 5 分鐘)去除上清液。
6. 上機(jī)分析。
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