產(chǎn)品名稱：GE 17-5442-02 Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml 淋巴細胞分離液 6 × 100 ml

產(chǎn)品貨號：17-5442-02?

GE Ficoll-Paque 淋巴細胞分離液是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸鈉溶液。Ficoll-Paque密度梯度介質利用簡單快速離心程序從少量或大量血液中有效提取高產(chǎn)和高純度的活單核細胞。Ficoll-Paque PLUS是無菌即用型產(chǎn)品，推薦用于單個核細胞的常規(guī)分離。

主要特征

1. 經(jīng)過嚴格的質量控制測試
2. 分離所得的細胞存活細胞率>90%
3. 低水平內毒素
4. 質量管理系統(tǒng)下生產(chǎn)，符合ISO 13485:2003標準（Ficoll-Paque PREMIUM）
5. 正確存儲條件下穩(wěn)定性至少保持3年

Ficoll-Paque淋巴細胞分離液產(chǎn)品分類

1. Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml單個核細胞分離液適用血液、骨髓和臍帶血來源的人單個核細胞分離制備，臨床研究和細胞治療生產(chǎn)級別。后續(xù)可以通過培養(yǎng)分離得到間充質干細胞。
2. Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 單個核細胞分離液適用密度較低的人單個核細胞的富集，如間充質干細胞和單核細胞，同樣應用于臨床研究和細胞治療。
3. Ficoll-Paque PLUS 用于人外周血的單個核細胞分離，僅供科研使用。

GE Ficoll-Paque 獲得的單個核細胞（含淋巴細胞）懸液具有以下特點：

1. 分離所得的細胞中95 ± 5%為單個核細胞
2. 分離所得的細胞存活細胞率 > 90%
3. 可回收原始的血液樣本中60 ± 20%的單個核細胞
4. 3 ± 2%的粒細胞
5. 5 ± 2%的紅細胞

Ficoll-Paque PLUS淋巴細胞分離液產(chǎn)品參數(shù)：

物理狀態(tài)：無色液體

密度：1.078 g/ml

pH范圍：5.5-7.5

內毒素活性：< 0.12 EU/ml

有效期：3年

保存：4℃-30℃

成分：Ficoll-Paque PLUS是一種無菌的、即用型的試劑，含有Ficoll PM400、泛影酸鈉和二鈉鈣EDTA。密度已經(jīng)被優(yōu)化，用于分離外周血的人淋巴細胞。

應用

人外周血、骨髓和臍帶血淋巴細胞分離

骨? 髓、胎盤間充質干細胞分離

?密度梯度離心原理

見圖，以人外周血為例，血液加入Ficoll-Paque密度梯度分離液后離心分層，從上到下分四層：

血漿層

單個核細胞層：淋巴細胞、單核細胞、血小板（骨髓和臍帶血等樣本還有間充質干細胞）

Ficoll-Paque分離液層：密度1.077g/mL

紅細胞、粒細胞層

紅細胞和多形核粒細胞比重較大，為1.092左右，而淋巴細胞和單核細胞比重較小，為1.075～1.090。Ficoll-Paque密度1.077g/mL介于兩者之間，并且分離液中的Ficoll PM400是一種高聚糖，能促進紅細胞凝集。

操作步驟

使用前把Ficoll-Paque density gradient media加熱到18°C – 20°C。若樣本量超過3mL，換用直徑更大的離心管，以保證Ficoll-Paque 分離液：2.4 cm，血液樣本：3.0 cm的高度。

樣本制備

使用新鮮血液確保所分離的單個核細胞的活性。樣本也要加熱到18°C – 20°C。

1.?10mL離心管加入2mL抗凝血和等量的平衡鹽溶液。

2.?顛倒或吸管混勻血液和緩沖液。

單個核細胞分離步驟

1.?Ficoll-Paque試劑瓶顛倒多次混勻。

注射器法吸取Ficoll-Paque分離液：

見圖，去掉聚丙烯蓋，插入注射器針頭。

吸管法吸取Ficoll-Paque分離液：

去掉聚丙烯蓋，拉起鋁環(huán)，拉開金屬密封，移除銀環(huán)。拿掉橡膠密封，無菌操作吸取需要的Ficoll-Paque分離液。

離心管加入3mLFicoll-Paque分離液。

稀釋過的血液樣本小心鋪到Ficoll-Paque分離液上面。

注意：鋪樣本時小心不要和Ficoll-Paque分離液混合。

離心400g，30-40min。18°C – 20°C。

用無菌吸管吸掉上層血漿和血小板，不要碰到單個核細胞層（圖4，圖5）。

無菌吸管轉移單個核細胞層到無菌離心管。

洗滌分離細胞

1.?預估轉移的單個核細胞的體積。加入至少3倍體積的平衡鹽溶液（約6mL）。

2.?用吸管輕柔重懸細胞。

3.?離心，400-500g，10-15min，18°C – 20°C。

注意：高速離心會加速單個核細胞的回復。但是，低速離心（60-100g）能去除血小板。

4.?去掉上清。

5.?6-8mL平衡鹽溶液重懸單個核細胞。

6.?離心，400-500g（或60-100g），10min，18°C – 20°C。

7.?去上清。

8.?使用下游所需液體重懸細胞沉淀。

產(chǎn)品訂購信息

品牌?貨號?產(chǎn)品描述?包裝

GE?17-1440-02?Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液?6 × 100 ml

GE?17-1440-03?Ficoll-Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液?6 × 500 ml

GE?17-5442-02?Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴細胞分離液?6 × 100 ml

GE?17-5442-03?Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml淋巴細胞分離液?6 × 500 ml

GE?17-5446-52?Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 淋巴細胞分離液?6× 100 ml