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【產(chǎn)品名稱】LaboBanker2?無血清凍存液
【產(chǎn)品特點(diǎn)】
·一款專為細(xì)胞長期凍存而研制的無血清細(xì)胞凍存液;
·使用安全明確的高分子聚合物,不含動(dòng)物蛋白和血清成分;
·無需程序降溫,使用方便,可直接放置于-80℃,復(fù)蘇后細(xì)胞活率高增殖力強(qiáng);
·使用于多種細(xì)胞長期低溫保存,更適合經(jīng)過無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的細(xì)胞凍存;
·經(jīng)過嚴(yán)格的細(xì)菌、真菌、內(nèi)毒素檢測(cè),使用安全可靠。
【使用方法】
凍存方法: 準(zhǔn)備所需凍存細(xì)胞,貼壁細(xì)胞按以下步驟進(jìn)行消化重懸:
1、將培養(yǎng)皿中的原培養(yǎng)基棄之,用 PBS 清洗細(xì)胞;
2、將 PBS 棄之,加 Trypsin/EDTA-PBS 室溫孵育 5 分鐘;
3、加入新的含血清培養(yǎng)基,用移液器輕輕吹打懸浮細(xì)胞; 如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,以上步驟可忽略,直接進(jìn)行步驟 4:
4、將細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);
5、細(xì)胞懸液 200-300g 離心 5 分鐘,上清液棄之;
6、加入預(yù)冷好的 LaboBanker2 凍存液重懸細(xì)胞至密度為 5×105個(gè)/ml 至 5×106個(gè) /ml;
7、將細(xì)胞懸液分裝入凍存管,每管體積為 0.5ml 至 1ml;
8、將細(xì)胞置于 2-8℃5 分鐘;
9、將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至-80℃保存。如需長期保存,-80℃過夜將細(xì)胞后轉(zhuǎn)移至液氮中。
復(fù)蘇方法:
1、將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃,離心機(jī)預(yù)熱至室溫;
2、取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi),晃動(dòng)凍存管直至細(xì)胞凍存懸液完全融化,注 意管口不能沒入水中;
3、將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至細(xì)胞凍存懸液 10 倍體積的培養(yǎng)基內(nèi),輕輕混 勻;
4、室溫離心后去除上清液;
5、加入 10ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)皿內(nèi);
6、將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 CO2培養(yǎng)箱中,按常規(guī)方法培養(yǎng)。
【注意事項(xiàng)】
1、所有的工作須在無菌室中進(jìn)行,請(qǐng)遵守嚴(yán)格無菌的工作規(guī)范,使用無菌耗材。
2、本產(chǎn)品請(qǐng)勿直接注射于人體。
3、本說明書使用方法僅供參考,使用者可根據(jù)所凍存細(xì)胞的特性進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
【保存及有效期】 2-8℃避光保存,有效期 36 個(gè)月。
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