英文名稱：In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein
中文名稱：原位細胞凋亡檢測試劑盒, 熒光素標記

原位細胞凋亡檢測試劑盒 產(chǎn)品介紹：
原們細胞凋亡檢測試劑盒廣泛應用于檢測細胞凋亡，包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。這種方法涉及DNA片斷分離，從給定細胞群的高分子量DNA中分離出低分子量DNA。因此，這些方法不能提供給定細胞群或組織切片中單個細胞命運的相關(guān)信息。鑒于此，個別凋亡細胞可放于顯微鏡下觀察，由于其發(fā)生凋亡時表現(xiàn)出核染色質(zhì)皺縮和破碎的獨特現(xiàn)象。但這種方法主觀性強，受限于在相對較短時間窗內(nèi)觀察（當細胞形態(tài)變化太大時）。細胞凋亡早期標志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA破裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標記的修飾核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP）在酶促反應中檢測到。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）催化脫氧核糖核苷酸獨立聚合為以3’-端結(jié)尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為TUNEL （TdT介導的dUTP-X 缺口末端標記）。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標記（模板依賴型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更靈敏快速。

» 樣本材料：懸浮細胞，細胞離心涂片器和細胞涂片制備，玻片上生長的貼壁細胞，冷凍和蠟包被的組織切片。
» 檢測原理：原位細胞凋亡檢測試劑盒基于對細胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測。凋亡細胞被固定和滲透。隨后，這些細胞和TUNEL反應混合物（包含TdT和熒光素-dUTP）一起孵育。孵育期間，TdT催化熒光素-dUTP標記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后，標記物包含在DNA斷裂位點處，用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡可觀察到。
» 產(chǎn)品成份：酶溶液（TdT）& 標記溶液（熒光素-dUTP）
» 產(chǎn)品應用：利用熒光顯微鏡在單細胞水平定性檢測細胞凋亡，流式細胞儀定量檢測調(diào)亡細胞

產(chǎn)品特性：
• 靈敏：直接用熒光素-dUTP標記降低了背景標記
• 快速：熒光素-dUTP標記在TUNEL反應結(jié)束后就可直接進行樣本分析（1-2 h）
• 方便：不需要進行二次檢測
• 精確：分子水平鑒定早期細胞凋亡（DNA鏈斷裂）