,主打一個抽象自嘲,“嗎嘍”“裝死者”“ATM-er”各種標(biāo)簽刷屏朋友圈,堪稱當(dāng)代打工人的精神嘴替,連細(xì)胞房搬磚人都被狠狠拿捏了!
!作為每天和“細(xì)胞口糧”打交道的人,突然靈光一閃——要是咱們的康寧Corning培養(yǎng)基去測SBTI,會測出什么炸裂搞怪人格?今天就來整活,帶大家解鎖康寧培養(yǎng)基的隱藏“養(yǎng)”格,順便蹲一蹲和你同人格的那瓶“口糧”,華雅生物康寧現(xiàn)貨速發(fā),不用等貨,測完直接沖!
(嚴(yán)肅提醒:梗歸梗,產(chǎn)品信息絕對精準(zhǔn),細(xì)胞房人放心抄作業(yè)?。?/div>
康寧培養(yǎng)基SBTI人格大賞(附貨號+用途,干貨拉滿)
。作為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的“開山前輩”,它主要負(fù)責(zé)過人外周血T細(xì)胞的活化及擴增培養(yǎng),管你什么T細(xì)胞,只要加了IL-2,它都能穩(wěn)穩(wěn)拿捏,還自帶硫酸卡那霉素抗生素buff,幫細(xì)胞抵御雜菌侵?jǐn)_??粗竺娴摹昂筝叀本硖炀淼?,它只會默默嘆氣:“現(xiàn)在的年輕人啊,太浮躁,還是穩(wěn)一點好”,畢竟能火二十年的經(jīng)典,實力從來不用多說!
。更厲害的是,它還能支持CAR-T等免疫治療應(yīng)用,直接把培養(yǎng)格局打開,從“基礎(chǔ)款”升級為“進(jìn)階款”,堪稱卷王屆的開山鼻祖,主打一個“青出于藍(lán)而勝于藍(lán)”!
!更絕的是,它根本不靠自體血漿“開掛”,僅憑自身實力就能完美支持T細(xì)胞和NK細(xì)胞擴增,專攻CAR-T、CAR-NK、TIL等高精尖領(lǐng)域,不管是科研實驗還是臨床應(yīng)用,它都能輕松hold住,堪稱科研界的“特種兵”,卷就完事兒了!
。專門適配對酚紅敏感、對抗生素敏感的細(xì)胞培養(yǎng)場景,尤其是NK細(xì)胞活化培養(yǎng),堪稱NK細(xì)胞的“專屬口糧”。別人卷營養(yǎng)、卷擴增,它卷“純凈”,主打一個“l(fā)ess is more”,畢竟對于敏感細(xì)胞來說,純粹才是最好的呵護(hù)!
。成分明確,不含任何動物來源成分,不用擔(dān)心細(xì)胞“過敏”;更貼心的是,無需包被培養(yǎng)表面,開箱就能用,堪稱細(xì)胞房懶人的福音。不管是哪種來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC),它都能溫柔呵護(hù),支持細(xì)胞體外擴增到八代以上,看著細(xì)胞舒舒服服長大,它從不催進(jìn)度、不卷指標(biāo),主打一個“佛系養(yǎng)細(xì)胞,快樂搞科研”,誰能不愛這樣的“神仙口糧”?
重點來了!細(xì)胞房人必看!
買培養(yǎng)基,找華雅!康寧中國代理商,現(xiàn)貨速發(fā),細(xì)胞房搬磚人再也不用為缺“口糧”發(fā)愁!DEAD 擺爛死者人格 ——BD RNA 采血管(762165)
這款BD 采血管堪稱樣本界的 “躺平王者”,主打一個靜止不動、安穩(wěn)存續(xù)。它能強效鎖住血液中的 RNA 樣本,18-25℃常溫可穩(wěn)定保存 3 天,2-8℃環(huán)境下能存放 5 天,即便在低溫凍存條件下,也能讓樣本穩(wěn)定長達(dá) 8 年??此坪翢o動靜的 “擺爛” 狀態(tài),實則完美守護(hù)核酸樣本完整性,是分子檢測實驗的得力幫手,也難怪不少人搜索BD 采血管樣本穩(wěn)定性時都會優(yōu)先提及它。
BOSS 掌控者人格 ——BD CPT 單核細(xì)胞分離管(362761)
作為實驗室里的氣場擔(dān)當(dāng),這款 8.0mL 的BD 真空采血管自帶專業(yè)分離膠,無需繁瑣的 Ficoll 操作,采血后直接離心就能快速完成單個核細(xì)胞分離,全程減少樣本污染風(fēng)險,高效又便捷。在細(xì)胞分離實驗中說一不二,牢牢掌控實驗流程,妥妥的 BOSS 級人格,也讓BD 采血管細(xì)胞分離應(yīng)用成為實驗室高頻關(guān)注的內(nèi)容。
MALO 嗎嘍佛系人格 ——BD P800 蛋白組學(xué)采血管(366420)
外表平平無奇的 2.0mL 小規(guī)格BD 采血管,走的就是低調(diào)佛系的嗎嘍路線。別看它體積小巧,內(nèi)部搭載多種蛋白酶抑制劑,能讓易降解的 GLP-1 等物質(zhì)穩(wěn)定超 70 小時,遠(yuǎn)超普通 EDTA 采血管的效果。平時低調(diào)不起眼,關(guān)鍵實驗中卻能發(fā)揮不可替代的作用,把佛系與實力完美結(jié)合,也印證了BD 采血管蛋白檢測適配性的強大優(yōu)勢。
GOGO 行動派人格 ——BD 21G 雙向采血針(360213)
搭配BD 采血管使用的這款采血針,是不折不扣的行動達(dá)人。采用斜面設(shè)計與硅膠涂層,穿刺順暢、回血快速,還能實現(xiàn)多管連續(xù)采血,全程干凈利落不拖沓,徹底告別操作內(nèi)耗。作為BD 采血管配套耗材,它以超強執(zhí)行力成為采血流程中的關(guān)鍵角色,適配各類臨床與科研采血場景。
ATM-er 奉獻(xiàn)者人格 ——Streck Cyto-Chex BCT 采集管(218980)
這款采集管專注守護(hù)細(xì)胞表面抗原,室溫下可讓樣本穩(wěn)定 14 天,無懼運輸與存放損耗,默默為流式細(xì)胞檢測保駕護(hù)航,全程無私奉獻(xiàn),精準(zhǔn)保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,與BD 采血管搭配使用,構(gòu)建起完善的免疫檢測樣本體系。
ZZZZ 潛伏裝死人格 ——Streck 游離 DNA 采血管(218962)
憑借專用穩(wěn)定劑與抗凝成分,這款采血管能在常溫下穩(wěn)定游離 DNA 72 小時,寬溫環(huán)境下最長可保存 14 天。平時看似低調(diào) “裝死”,實則牢牢鎖住游離 DNA,在液態(tài)活檢、無創(chuàng)產(chǎn)前檢測中瞬間發(fā)力,成為精準(zhǔn)檢測的幕后功臣,也與BD 采血管共同支撐起高端分子檢測的樣本需求。
溫馨提示:SBTI 人格測試純屬趣味玩梗,大家娛樂放松即可。而華雅思創(chuàng)生物供應(yīng)的BD 采血管及配套 Streck 采血管,均為經(jīng)過市場驗證的專業(yè)耗材,廣泛應(yīng)用于基因檢測、流式分析、蛋白研究等多個領(lǐng)域,是實驗室靠譜的實驗伙伴。下次在實驗室見到這些采血管,不妨也給它們貼上專屬的 SBTI 標(biāo)簽吧!
]]>ProteanFect?不僅支持mRNA、siRNA、DNA等多種核酸分子的常規(guī)基因功能研究,更深度適配RNP(核糖核蛋白)介導(dǎo)的基因編輯體系。憑借其優(yōu)異的線性放大能力ProteanFect?能夠滿足從微量預(yù)實驗到大規(guī)模驗證的全流程,為學(xué)術(shù)研究提供穩(wěn)健的底層技術(shù)支撐。
以下是近期發(fā)表的研究成果,展示了ProteanFect?在不同科研領(lǐng)域及細(xì)胞類型中的卓越表現(xiàn):

題目:CD160 dictates anti-PD-1 immunotherapy resistance by regulating CD8+?T cell exhaustion in colorectal cancer
細(xì)胞:小鼠原代CD160? CD8? T細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT03

題目:Mycobacterium tuberculosis-derived linoleic acid increases regulatory T cell function to promote bacterial survival within macrophages
細(xì)胞:小鼠原代CD4+?Treg細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT03

題目:High fructose consumption aggravates inflammation by promoting effector T cell generation via inducing metabolic reprogramming
細(xì)胞:小鼠原代CD4+?T細(xì)胞
目的:Cas9 mRNA與sgRNA共轉(zhuǎn)敲除基因
試劑盒:PT06

題目:H2A.Z primes an epigenetic landscape for memory CD8+ T cell recall response
細(xì)胞:人原代CD8? T細(xì)胞
目的:Cas9 mRNA與sgRNA共轉(zhuǎn)敲除基因
試劑盒:PT05

題目:Spatially resolved multi-omics of human metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease
細(xì)胞:THP1細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT01

題目:Phosphorylation of shiftless is important for inhibiting the programmed?1 ribosomal frameshift
細(xì)胞:Jurkat細(xì)胞
目的:質(zhì)粒過表達(dá)基因
試劑盒:PT01

題目:Ginsenoside F3 alleviates T cell exhaustion via RIPOR2-mediated immunometabolic reprogramming to potentiate anti-PD-1 therapy
細(xì)胞:小鼠原代CD8+?T細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT03
?

題目:Single-nucleus RNA sequencing illuminates a functional analog of lymphoid organ in crustacean
細(xì)胞:Jurkat細(xì)胞
目的:質(zhì)粒過表達(dá)基因
試劑盒:PT01

題目:Fatty acid uptake mediated by FABP4 promotes the formation of CD8+T cell senescence through lipid peroxidation in the adipocyte-rich microenvironment of Ovarian Cancer
細(xì)胞:小鼠原代CD8+?T細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT03

題目:Cord blood natural killer cell-derived extracellular vesicles inhibit Zika virus infectivity through ITGB2/perforin-mediated envelope disruption in vitro and in vivo
細(xì)胞:臍帶血NK細(xì)胞
目的:siRNA敲低基因
試劑盒:PT02
?

題目:Single-round evolution of RNA aptamers with GRAPE-LM
細(xì)胞:Jurkat細(xì)胞
目的:spCas9-GFP蛋白與sgRNA共轉(zhuǎn)敲除基因
試劑盒:PT08
ProteanFect?轉(zhuǎn)染試劑盒,不僅是你攻克實驗難關(guān)的得力工具,更已成為眾多科研人發(fā)表高質(zhì)量文獻(xiàn)的“助推器”。
華雅思創(chuàng)生物作為西湖凝聚體的授權(quán)代理商,為您提供西湖凝聚體ProteanFect系列產(chǎn)品,歡迎聯(lián)系華雅思創(chuàng)客服咨詢購買
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豐富的產(chǎn)品線
涵蓋NGS精準(zhǔn)醫(yī)療、科研產(chǎn)品、生物制藥、實驗耗材、生物技術(shù)產(chǎn)品、細(xì)胞治療、精密儀器。
實時更新庫存與新品信息,確保您獲取高質(zhì)量的產(chǎn)品資源。
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未來,華雅思創(chuàng)生物將持續(xù)傾聽用戶的聲音,不斷迭代更新,提供更多優(yōu)質(zhì)服務(wù)。讓我們攜手共進(jìn),以科技力量驅(qū)動生命科學(xué)的無限可能!
]]>北京紅榮微再生物工程技術(shù)有限公司的成立標(biāo)志著華雅生物集團(tuán)全國戰(zhàn)略部署的初步完成,公司由此走上了新的一個階段,相信在接下來的日子里,廣大客戶可以享受到更加專業(yè)便捷的企業(yè)服務(wù),和我們一起發(fā)展進(jìn)步,攜手為中國分子診斷的發(fā)展而努力。
國家林業(yè)和草原局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2021年2月5日發(fā)布公告(2021年第3號),內(nèi)毒素檢測試劑所用原料鱟(中國鱟及圓尾鱟)被列為國家二級保護(hù)動物,意味著內(nèi)毒素檢測試劑原料將受到嚴(yán)格管控。

內(nèi)毒素檢測試劑所用原料鱟(中國鱟及圓尾鱟)被列為國家二級保護(hù)動物的原因其實很簡單。鱟的歷史可以追溯至古生代的泥盆紀(jì),那時,恐龍尚未出現(xiàn),原始魚類剛剛問世。然而,自從鱟被用來開發(fā)檢測內(nèi)毒素之后,世界各地均出現(xiàn)瘋狂捕撈過度開采的現(xiàn)象。就我國而言,因索取無度,才20余年我國沿海的鱟已從遍布海灘到幾乎絕跡。


? 出于對這些因素的考慮,Lonza意識到鱟對提高藥品和醫(yī)療設(shè)備的安全性及其生態(tài)作用的重要性。積極支持鱟的保護(hù),并致力于供應(yīng)鏈的穩(wěn)定性及可持續(xù)性。
LONZA四種細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法

1.凝膠法LAL分析:簡單的LAL分析,目測檢查凝膠的形成
2.顯色法LAL分析:動態(tài)或終點顯色測量,可定量讀取所測樣品中的內(nèi)毒素濃度。
3.比濁法LAL分析:動態(tài)檢測濁度的形成,是水樣品或大劑量腸胃外藥物內(nèi)毒素檢測的一種經(jīng)濟有效的方法。
4.重組C因子分析:LAL的非動物替代品,基于重組表達(dá)生產(chǎn)的C因子,C因子是鱟凝血級聯(lián)反應(yīng)中的第一個成分,不依靠鱟血作為試劑原料。

值得一提的是,Lonza開發(fā)的PyroGene
重組表達(dá)的C因子檢測方法是能夠取代鱟試劑的檢測方法。C因子是內(nèi)毒素激活的鱟凝固級聯(lián)反應(yīng)中的第一個組成部分,只用于內(nèi)毒素檢測,是進(jìn)行內(nèi)毒素釋放測試的可靠替代方案。

LAL和重組C因子檢測的原理示意圖
重組C因子是一種化學(xué)合成的試劑,性狀更穩(wěn)定,均一性相對也更好。目前,F(xiàn)DA現(xiàn)已批準(zhǔn)重組C因子作為鱟試劑的替代方案,用于生物制品的放行和過程檢測。內(nèi)毒素檢測只是生物制劑質(zhì)量控制的冰山一角,然而這一角冰山卻足以毀滅一個物種。華雅思創(chuàng)生物作為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的一分子,我們攜手客戶:一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類健康問題,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),推動世界和諧持續(xù)發(fā)展。
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2021 年 6 月 22 日,國家藥品監(jiān)督管理局公開信息顯示,上海復(fù)星醫(yī)藥(集團(tuán))股份有限公司投資的復(fù)星凱特生物科技有限公司的 CD19 靶點自體 CAR-T 細(xì)胞治療產(chǎn)品阿基侖賽注射液的上市注冊審批狀態(tài)更新為“藥品批準(zhǔn)證明文件待領(lǐng)取”,批準(zhǔn)文號為“國藥準(zhǔn)字 S20210019”。
值得一提的是,F(xiàn)KC876是復(fù)星凱特在中國推進(jìn)商業(yè)化的第一個CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品,也是國家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)迄今為止正式受理上市申請的第一個CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品。作為一種全新的腫瘤治療手段,F(xiàn)KC876能夠為中國接受了二線或以上系統(tǒng)性治療后復(fù)發(fā)或難治的大B細(xì)胞淋巴瘤患者帶來新生的希望和機會。
代號FKC876,是復(fù)星凱特從Kite Pharma引進(jìn)YESCARTA (Axicabtagene Ciloleucel)技術(shù)、并獲授權(quán)在中國進(jìn)行本地化生產(chǎn)的靶向CD19自體CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品。YESCARTA已于2017年10月18日獲得美國FDA批準(zhǔn)上市,治療復(fù)發(fā)難治性大B細(xì)胞淋巴瘤成人患者,包括彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)非特指型、原發(fā)性縱隔B細(xì)胞淋巴瘤(PMBCL)、高級別B細(xì)胞淋巴瘤和濾泡淋巴瘤轉(zhuǎn)化的DLBCL,是美國FDA批準(zhǔn)的針對特定非霍奇金淋巴瘤的CAR-T細(xì)胞藥物。2018年8月27日,YESCARTA成為歐洲第一批獲批上市應(yīng)用的CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品,用于治療復(fù)發(fā)或難治性彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)和原發(fā)性縱隔B細(xì)胞淋巴瘤(PMBCL)。
CAR-T免疫細(xì)胞治療是通過基因工程修飾患者自體T細(xì)胞,以表達(dá)靶向腫瘤抗原的嵌合抗原受體分子,由激活的T細(xì)胞介導(dǎo)殺傷腫瘤細(xì)胞。FKC876靶向的是B細(xì)胞特異抗原CD19,其NDA上市申請是基于復(fù)星凱特在中國開展的一項單臂、開放性、多中心橋接臨床試驗(FKC876-2018-001),在難治性侵襲性NHL(大B細(xì)胞淋巴瘤)中國患者中評估了本品的安全性和療效。
Kite Pharma進(jìn)行的ZUMA-1注冊臨床研究,主要評估YESCARTA (Axicabtagene Ciloleucel)在101例復(fù)發(fā)/難治性大B細(xì)胞淋巴瘤成人患者中的療效和安全性,2017年12月公布的ZUMA-1研究1年隨訪結(jié)果顯示:最佳總緩解率為82%,完全緩解率達(dá)到了54%;2018年12月公布了2年隨訪結(jié)果:中位隨訪27.1個月,仍有39%的受試者持續(xù)緩解,其中37%的受試者持續(xù)完全緩解。2019年12月公布了3年隨訪結(jié)果:中位隨訪時間39.1月,總生存率為47%,中位生存時間達(dá)到25.8月。
Kite Pharma還在開展評估CAR-T細(xì)胞療法作為高危大B細(xì)胞淋巴瘤(LBCL)一線治療方案的研究。一項名為ZUMA-12的多中心、開放、單臂2期臨床研究中期結(jié)果顯示,Yescarta用于一線治療高危大B細(xì)胞淋巴瘤,單次輸注后85%患者產(chǎn)生應(yīng)答 (ORR),74%患者獲得完全緩解(CR), 中位隨訪期9.3個月70%患者仍持續(xù)緩解。
在第62屆美國血液學(xué)年會(ASH)上,德克薩斯大學(xué)MD安德森癌癥中心的Sattva S.Neelapu博士曾總結(jié)道,ZUMA-12作為將CAR-T細(xì)胞療法用于高危LBCL 一線治療的臨床研究,中期分析數(shù)據(jù)顯示了顯著的臨床獲益和可控的安全性,為CAR-T細(xì)胞療法在高危LBCL中探索起了積極作用。
細(xì)胞治療產(chǎn)品市場是生物醫(yī)藥市場增長最快的子領(lǐng)域之一。干細(xì)胞領(lǐng)域,2014年全球干細(xì)胞治療市場規(guī)模約為507億美元,2018年全球干細(xì)胞治療市場規(guī)模達(dá)1370億美元,年復(fù)合增長率高達(dá)22%。預(yù)計未來干細(xì)胞治療市場增速將持續(xù)維持在20%以上。
免疫細(xì)胞領(lǐng)域,據(jù)Coherent Market Insights預(yù)測,在2018-2028年期間,全球CAR-T細(xì)胞治療市場價值將以高達(dá)46.1%的平均年復(fù)合增長率增長。在未來一段時間內(nèi),北美仍將占據(jù)全球CAR-T細(xì)胞治療50%以上的市場份額,歐洲市場居于次席。但隨著中國CAR-T相關(guān)政策的推進(jìn)以及研發(fā)力度的增強,越來越多的企業(yè)涌入CAR-T行業(yè)市場,中國有望在未來短時間內(nèi)彎道超車,占據(jù)很大一部分全球市場份額。而復(fù)星凱特Yescarta獲批上市無疑是中國細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)的一次里程碑式的事件,也是行業(yè)發(fā)展的強心針。
華雅生物集團(tuán)從2012年涉足細(xì)胞治療行業(yè),深耕近10年,著力打造全國品牌與核心競爭力。在全球CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)爆發(fā)性發(fā)展的2017年以來,華雅生物一直緊跟時代發(fā)展的潮流,已經(jīng)成為國內(nèi)細(xì)胞治療行業(yè)優(yōu)秀的供應(yīng)商和合作伙伴。未來,華雅生物集團(tuán)將攜手客戶一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類健康問題,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),推動世界和諧持續(xù)發(fā)展。
人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基Cellartis MSC Xeno-Free Culture Medium(Y50200),無異源物質(zhì)級別,有效促進(jìn)骨髓、脂肪、臍帶來源間充質(zhì)干細(xì)胞的擴增和特性維持。
歡迎新老客戶踴躍參與,活動時間?2021年3月1日-4月30日。
希望該產(chǎn)品的使用,可以幫助您更好地了解間充質(zhì)干細(xì)胞的研究。

?人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品優(yōu)勢
·??無異源物質(zhì)、無血清、無動物源成分,更適于再生醫(yī)療研究。
·??維持間充質(zhì)干細(xì)胞表型,表達(dá)CD標(biāo)志物和維持多向分化潛能。
·??支持穩(wěn)健的增殖,以獲得足夠的細(xì)胞數(shù)目應(yīng)用于細(xì)胞治療研究。
·??在常規(guī)組織培養(yǎng)板上即可培養(yǎng),無需包被,更靈活和容易使用。
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?(2021年3月1日-4月30日)
1. Y50200開展“免費試用”活動?。。?/strong>
2.?試用活動客戶首單采購Y50200可專享25%off折扣,數(shù)量不限,僅限首單?。?!
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什么是SURESELECTXT HS?
SureSelectXT HS 試劑盒作為安捷倫靈敏度高的雜交捕獲型文庫制備和 用于 NGS 的靶向序列捕獲解決方案,成為了 SureSelect 文庫制備試劑 家族中的成員。
———————————————-主要特征—————————————
? DNA 起始量?10 ng
? 針對高質(zhì)量完整 DNA 以及低質(zhì)量和高質(zhì)量?FFPE DNA?進(jìn)行了優(yōu)化
??分子條形碼 (MBC)?標(biāo)記文庫可提高陽性預(yù)測值 (PPV)
??復(fù)雜度更高的文庫,在靶標(biāo)區(qū)域中的讀出序列百分比更高
?90 分鐘雜交和反應(yīng)預(yù)混試劑,實現(xiàn)更快速更高效的工作流程
FFPE 優(yōu)化文庫制備的重要性
盡管 FFPE 樣品為多種遺傳信息提供了有價值的來源,但從 FFPE 組織中分離 DNA 的難題 在于純化足夠分子量的 DNA 以及達(dá)到一定的擴增和檢測質(zhì)量。通常而言,當(dāng) FFPE DNA 制備出來用于文庫生成時,其降解程度已過高而無法用于高靈敏度的 NGS。因此,有 必要通過優(yōu)化文庫制備與盡量減少步驟數(shù)降低樣品損失,并從挑戰(zhàn)性樣品類型中獲得 高質(zhì)量文庫。
針對 FFPE 優(yōu)化的安捷倫文庫制備
對于新鮮樣品與 FFPE 樣品中的多種組織類型,SureSelectXT HS 僅用 10-200 ng 起始原料即 可生成靶標(biāo)區(qū)域讀出序列百分比較高的更復(fù)雜文庫。為改善不同質(zhì)量 FFPE 樣品單核苷 酸變異 (SNV) 的識別和一致性,安捷倫已開發(fā)出一款完整的工作流程解決方案,該方 案具有 DNA 質(zhì)量預(yù)評估(FFPE QC 試劑盒,部件號 G9700A 和 G9700B 以及 4200 TapeStation 系統(tǒng))和單管文庫制備功能。

圖 1. SureSelectXT HS 已針對 FFPE 進(jìn)行了性能優(yōu)化,在質(zhì)量逐漸降低的樣品中多數(shù)堿基覆蓋率達(dá)到了 20X。?將測序深度越來越高的 20X 以上讀取深度覆蓋(4 百萬到 8 百萬 – 2×100 bp 讀出序列)的堿基百分比相對于 gDNA 質(zhì)量(基于 qPCR 的 gDNA 質(zhì)量 (ddCq),并用安捷倫 FFPE QC 檢測試劑盒進(jìn)行計算)作圖

圖 2. SureSelectXT HS 在 100X 覆蓋率下優(yōu)于其他文庫制備解決方案,尤其是在樣品質(zhì)量下降時:根據(jù) 8 百萬 – 2×100 bp 讀出序列的 1000X 測序深度,將 100X 以上讀取深度覆蓋的堿基百分比相對于質(zhì)量越來越低的 gDNA (基于 qPCR 的 gDNA 質(zhì)量 (ddCq),并用安捷倫 FFPE QC 檢測試劑盒進(jìn)行計算)作圖
高靈敏度的重要性
靈敏度指的是得到正確鑒定的真實變異的百分比。在大多數(shù)情況下,靈敏度受到起始 量、檢測性能以及 PCR 與測序錯誤率的限制。因此,傳統(tǒng) NGS 檢測的錯誤水平通常會 由于腫瘤異質(zhì)性而影響低頻變異的檢測可信度。
SureSelectXT HS 的出色靈敏度
SureSelectXT HS 中包括的分子條形碼可幫助用戶在文庫制備、靶向序列捕獲和測序等可能 產(chǎn)生假陽性變異的過程中過濾出假陽性結(jié)果。SureSelectXT HS 中的分子條形碼對罕見變異的檢測頻率低至 ≤ 1%。多數(shù)用戶采用置信閾值且僅對等 位基因頻率高于 3%-5% 的變異進(jìn)行識別,因此這一性能十分重要。

圖 3. 等位基因頻率低至 1% 時的檢測結(jié)果。SureSelectXT HS 生成的文庫在測序深度 3000X 時,即使在 VAF 頻率低至 1% 時觀測值和頻率預(yù)計值之間也具有高度關(guān)聯(lián)性(HD200 定量多重參考標(biāo)樣和 ClearSeq 綜合癌癥基因組合)
什么是分子條形碼?
分子條形碼是獨特的 DNA 序列,它附著在給定樣品中的每個原始 DNA 上。這些獨 特的 DNA 序列包含隨機的核苷酸、部分簡并核苷酸或核苷酸。分子條形碼附著在 DNA 上,為每個起始分子分配獨特的識別碼。

分子條形碼為何如此重要?
PCR 擴增和測序過程中引入的錯誤提高了原始 DNA 模板的整體錯誤率。這些錯誤或假 陽性結(jié)果降低了樣品中低水平真實突變的靈敏度。這個問題尤其容易發(fā)生在某些腫瘤 亞群等異質(zhì)性更高的細(xì)胞群中。分子條形碼通過消除假陽性結(jié)果并提供誤差校正以實 現(xiàn)更準(zhǔn)確的變異識別,幫助用戶檢測模板 DNA 分子中的低頻突變。

圖 4. 利用分子條形碼 (MBC) 分析提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。對 Horizon cfDNA 參照和定制 164 kb SureSelect 基因組合構(gòu)建的 SureSelectXT HS 文庫進(jìn)行靶向測序,在去冗余后達(dá)到了 808(標(biāo)準(zhǔn))/906 (MBC) 的中等覆蓋率。經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)去冗余 后,在小于 2% 的變異等位基因頻率下檢測出 216 個非參照等位基因,而采用 MBC 得到的這一數(shù)字僅為 18。這表明錯誤識別減少了 92%。數(shù)據(jù)結(jié)果由英國倫敦癌癥研究所演化和癌癥中心的 L.J. Barber 博士和 M. Gerlinger 博士提供
SureSelectXT HS 可減少單獨酶法步驟、清除步驟和樣品轉(zhuǎn)移,使用戶簡化工作流程并維 持文庫復(fù)雜度,在較低起始量(低至 10 ng)下更是如此。我們的 90 分鐘雜交與更高效的反應(yīng)預(yù)混試劑結(jié)合使用,可使用戶 在一天內(nèi)完成從樣品處理到生成待測序文庫的過程。此外,工作流程支持在一次混 合中對最多 32 個樣品進(jìn)行深度多重測序。

優(yōu)點
? 90 分鐘雜交和反應(yīng)預(yù) 混試劑有助于更快速 更高效地處理樣品
? 在不到一天的時間內(nèi) 將樣品轉(zhuǎn)化為待測序 文庫
? Agilent SureCall 軟件有 助于簡化數(shù)據(jù)分析 簡化的工作流程有助于加快分析速度
SureSelect 文庫制備與靶向序列捕獲解決方案
安捷倫公司具有多種文庫制備和靶向序列捕獲解決方案,適用于癌癥和遺傳性疾病應(yīng) 用。無論 DNA 起始量低至 10 ng 或高達(dá) 3 μg,文庫制備和靶向序列捕獲解決方案均可與 ClearSeq 基因組合、SureSelect 外顯子組或定制基因組合完美匹配。

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