
| 特征維度 | 具體參數(shù) |
| 核心成分 | 管內(nèi)預(yù)裝專利試劑,可在采血瞬間穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA |
| 預(yù)期用途 | 全血采集、細(xì)胞內(nèi)RNA即時(shí)穩(wěn)定、與PAXgene RNA純化系統(tǒng)整合使用 |
| 穩(wěn)定性窗口 | 室溫(18-25℃)可穩(wěn)定長達(dá)3天;2-8℃可穩(wěn)定長達(dá)5天 |
| 長期儲(chǔ)存 | 可置于?-20℃至-70℃?冷凍長期保存 |
| 儲(chǔ)存條件 | 未使用試管儲(chǔ)存于?18-25℃;允許短時(shí)溫度偏移至40℃ |
| IVD資質(zhì) | 首-個(gè)上市用于分子診斷檢測(cè)的全血采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存及細(xì)胞內(nèi)RNA穩(wěn)定的閉環(huán)IVD產(chǎn)品 |
BD PAXgene 762165采血管基于對(duì)全血RNA即時(shí)穩(wěn)定需求的深刻理解,具備以下核心特征:
相較于普通采血管或傳統(tǒng)處理方式,PAXgene Blood RNA Tube的優(yōu)勢(shì)顯著:
普通采血管中,血細(xì)胞離體后基因表達(dá)譜會(huì)迅速改變(如應(yīng)激相關(guān)基因即刻上調(diào))。PAXgene管內(nèi)的專利試劑在采血瞬間滲透細(xì)胞,立即抑制RNA降解并“凍存”當(dāng)時(shí)的轉(zhuǎn)錄狀態(tài),確保所測(cè)即所得,避免假性表達(dá)變化。
無需冷鏈運(yùn)輸全血樣本:室溫下穩(wěn)定長達(dá)3天,使樣本可以從采血點(diǎn)便捷地集中運(yùn)輸?shù)街行膶?shí)驗(yàn)室,大幅降低了物流成本與對(duì)低溫運(yùn)輸設(shè)備的要求——尤其適合多中心臨床試驗(yàn)或第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)樣本的跨區(qū)域流轉(zhuǎn)。
穩(wěn)定后的血液可在-20℃至-70℃長期凍存,實(shí)驗(yàn)人員無需在采血后立即處理樣本,可按項(xiàng)目進(jìn)度分批提取RNA,提高了工作流程的靈活性。
該產(chǎn)品是PAXgene Blood RNA System的核心組成部分,該系統(tǒng)整合了采血→細(xì)胞內(nèi)RNA穩(wěn)定→RNA純化的關(guān)鍵步驟,形成了從“血管到結(jié)果”的標(biāo)準(zhǔn)化工作流。性能特征已通過FOS和IL1B基因轉(zhuǎn)錄本的系統(tǒng)驗(yàn)證,減少了因操作差異引入的批間誤差。
這些優(yōu)勢(shì)將直接轉(zhuǎn)化為科研與臨床診斷工作中的實(shí)際利益:
| 利益維度 | 具體體現(xiàn) |
| 保障數(shù)據(jù)真實(shí)性與可重復(fù)性 | 即時(shí)穩(wěn)定機(jī)制消除了離體基因表達(dá)的人工改變;標(biāo)準(zhǔn)化IVD系統(tǒng)確保不同時(shí)間、不同操作者所得結(jié)果一致。這對(duì)于生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)、疾病分型、藥效評(píng)估等關(guān)鍵研究意義重大 |
| 簡化樣本管理流程 | 室溫存放與運(yùn)輸能力,使樣本采集不再受制于冷鏈條件;長達(dá)3-5天的穩(wěn)定窗口,減少了因處理延遲導(dǎo)致樣本廢棄的風(fēng)險(xiǎn),提高了臨床試驗(yàn)或大規(guī)模隊(duì)列研究的樣本有效率 |
| 降低運(yùn)營成本 | 無需冷鏈運(yùn)輸,節(jié)省了干冰、保溫箱及快遞費(fèi)用;可分批提取RNA,優(yōu)化了人力與設(shè)備利用效率 |
| 提升實(shí)驗(yàn)室合規(guī)性與診斷可靠性 | 作為IVD級(jí)產(chǎn)品,其性能特征已建立并驗(yàn)證,便于分子診斷實(shí)驗(yàn)室建立標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序(SOP)并通過質(zhì)量體系認(rèn)證(如CAP、CLIA);穩(wěn)定的RNA質(zhì)量確保下游RT-PCR檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠 |
BD的所有承諾都基于扎實(shí)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)、法規(guī)資質(zhì)與品牌信譽(yù):
性能特征已確立:使用FOS和IL1B基因轉(zhuǎn)錄本作為代表性靶標(biāo),對(duì)PAXgene Blood RNA System的性能進(jìn)行了系統(tǒng)驗(yàn)證,覆蓋線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度等關(guān)鍵指標(biāo)。
穩(wěn)定性數(shù)據(jù)充分:室溫3天、2-8℃下5天的穩(wěn)定時(shí)間,以及-20℃至-70℃下的長期存儲(chǔ)條件,均經(jīng)過了系統(tǒng)性的穩(wěn)定性研究確認(rèn)。

IVD市場首創(chuàng):該產(chǎn)品是首-個(gè)上市的用于分子診斷檢測(cè)的全血采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存及細(xì)胞內(nèi)RNA穩(wěn)定的閉環(huán)IVD產(chǎn)品,具有里程碑式的法規(guī)地位。
使用前請(qǐng)參閱官方說明書:BD明確提示,使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀產(chǎn)品隨附的使用說明書(IFU)、用戶手冊(cè)及技術(shù)數(shù)據(jù)表,確保符合預(yù)期用途與操作規(guī)范。
BD技術(shù)傳承:BD在標(biāo)本采集領(lǐng)域擁有數(shù)十年的技術(shù)積累。產(chǎn)品性能對(duì)比(如適用)是基于與舊版BD技術(shù)、手動(dòng)方法或一般性能聲明的比較,體現(xiàn)了持續(xù)的技術(shù)迭代。
質(zhì)量證書可獲取:用戶可通過BD官方渠道獲取產(chǎn)品的質(zhì)量證書(Quality Certificates),滿足實(shí)驗(yàn)室合規(guī)性審查需求。
在基因表達(dá)分析中,數(shù)據(jù)的真實(shí)性從血液離開血管的那一刻就已注定。PAXgene Blood RNA Tube (762165) 不僅是一款采血管,更是確保全血RNA從采集點(diǎn)到達(dá)檢測(cè)儀器時(shí)依然“述說真相”的標(biāo)準(zhǔn)化橋梁。
對(duì)于正在開展多中心臨床試驗(yàn)、生物樣本庫建設(shè)、分子診斷項(xiàng)目開發(fā)或轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的機(jī)構(gòu),選擇PAXgene管,即是選擇了一種可溯源、可重復(fù)、可信賴的RNA分析起點(diǎn)。
Q1:PAXgene Blood RNA Tube (762165) 的預(yù)期用途是什么?
A:該產(chǎn)品是PAXgene Blood RNA System的核心組成部分,預(yù)期用于全血的采集、儲(chǔ)存、運(yùn)輸,并在封閉的采血管中即時(shí)穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA,隨后可從全血中分離純化細(xì)胞內(nèi)RNA,用于下游分子診斷檢測(cè)。
Q2:采血后,RNA能穩(wěn)定多長時(shí)間?
A:根據(jù)驗(yàn)證數(shù)據(jù),采血后的穩(wěn)定性窗口如下:
室溫 (18-25℃):穩(wěn)定長達(dá)3天
冷藏 (2-8℃):穩(wěn)定長達(dá)5天
冷凍 (-20℃至-70℃/-80℃):可長期儲(chǔ)存,經(jīng)驗(yàn)證至少可穩(wěn)定50個(gè)月
Q3:采血后需要立即處理嗎?為什么手冊(cè)說要等2小時(shí)?
A:不需要立即處理,但必須等待至少2小時(shí)。采血后,將PAXgene管垂直置于室溫(18-25℃)下至少2小時(shí)(最多72小時(shí)),這是為了確保管內(nèi)的專利試劑充分裂解血細(xì)胞,使RNA完全釋放并被穩(wěn)定。如果采血后直接冷凍或冷藏而未經(jīng)過這2小時(shí)的室溫孵育,后續(xù)處理前必須先回溫至室溫并補(bǔ)足2小時(shí)孵育時(shí)間。
Q4:采血量必須精確到2.5mL嗎?少抽點(diǎn)血可以嗎?
A:不可以少抽。該管的設(shè)計(jì)采血量為2.5mL,這是實(shí)現(xiàn)正確的血液與添加劑比例的關(guān)鍵。采血不足會(huì)導(dǎo)致比例失衡,可能導(dǎo)致分析結(jié)果錯(cuò)誤或產(chǎn)品性能下降。管內(nèi)的真空系統(tǒng)設(shè)計(jì)用于精確采集2.5mL(但實(shí)際采血量可能受海拔、溫度、氣壓、靜脈壓和采血技術(shù)等因素影響而略有波動(dòng))。
Q5:PAXgene管應(yīng)該在第幾管采血?
A:PAXgene管盡可能不作為第一管采集。如果它是唯·一需要采集的試管,則必須在采集PAXgene管之前,先采集一個(gè)丟棄管(Discard Tube),以“預(yù)充”采血裝置的管路內(nèi)部空間,確保后續(xù)采集到PAXgene管中的血量準(zhǔn)確(2.5mL)。
Q6:采血后需要混勻嗎?怎么混勻?
A:需要立即混勻。采血后,應(yīng)立即輕輕地將PAXgene管上下顛倒8-10次,確保管內(nèi)的添加劑與血液充分混合。不充分混合會(huì)導(dǎo)致RNA穩(wěn)定不徹底。
Q7:采血過程中有什么特殊注意事項(xiàng)?
A:為防止血液回流,請(qǐng)遵循以下技術(shù)要點(diǎn):
將供樣者的手臂向下放置
采血過程中保持試管垂直,位置低于供樣者手臂水平
血液開始流入試管后,立即松開壓血帶
確保添加劑在穿刺過程中不接觸塞子或采血針末端
采血完成后等待至少10秒鐘,確保血液已停止流入后再從固定器上取下試管
Q8:未使用的PAXgene管應(yīng)該如何儲(chǔ)存?
A:未使用的PAXgene Blood RNA Tube應(yīng)儲(chǔ)存在18-25℃條件下。允許短時(shí)溫度偏移至40℃。使用前請(qǐng)檢查包裝上的有效期,請(qǐng)勿使用過期產(chǎn)品。
Q9:如何正確冷凍PAXgene管?
A:冷凍步驟如下:
1.將PAXgene管垂直放置在金屬架中(請(qǐng)勿使用泡沫塑料支架,可能導(dǎo)致試管破裂)
2.先置于?-20℃?冷凍至少24小時(shí)
3.然后轉(zhuǎn)移至?-70℃/-80℃?進(jìn)行長期儲(chǔ)存
4.冷凍后的PAXgene管需妥善固定在硬紙板凍存盒中(建議使用帶49格隔板的3-4英寸高紙板盒),避免在運(yùn)輸和處理過程中因碰撞而破裂
Q10:冷凍后的PAXgene管如何解凍?
A:將PAXgene管放在金屬架上,于室溫(18-25℃)?下解凍約2小時(shí)。請(qǐng)勿在超過25℃的溫度下解凍。解凍后,小心顛倒混勻10次。如果冷凍前未完成2小時(shí)室溫孵育,解凍后仍需在室溫下孵育至少2小時(shí)才能繼續(xù)處理。
Q11:PAXgene管在運(yùn)輸過程中容易破裂嗎?如何避免?
A:冷凍后的PAXgene管如果受到?jīng)_擊,確實(shí)可能像玻璃管一樣破裂。為降低風(fēng)險(xiǎn):
1.將試管妥善固定在硬紙板凍存盒中,使用49格隔板保持穩(wěn)定
2.可用橡皮筋固定盒子,確保其不會(huì)在運(yùn)輸中打開
3.選擇合適尺寸的二級(jí)包裝(如Tyvek袋)
4.請(qǐng)勿在同一盒子中混裝不同規(guī)格的試管(如2mL凍存管)
5.用戶應(yīng)自行驗(yàn)證其冷凍和運(yùn)輸方法
Q12:PAXgene管適用于病毒RNA的采集嗎?
A:不適用。PAXgene Blood RNA System不適用于病毒RNA的采集和純化。該系統(tǒng)專為全血中細(xì)胞內(nèi)RNA(如人源血細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄本)的穩(wěn)定和純化而設(shè)計(jì)。
Q13:PAXgene管必須搭配PAXgene RNA Kit使用嗎?
A:是的。使用PAXgene管采集的血液樣本,必須配合PAXgene Blood RNA Kit進(jìn)行RNA純化。其他純化系統(tǒng)可能不兼容,導(dǎo)致RNA產(chǎn)量或純度不佳。
Q14:該產(chǎn)品已經(jīng)驗(yàn)證過哪些基因靶標(biāo)?
A:PAXgene Blood RNA System的性能特征已通過FOS和IL1B基因轉(zhuǎn)錄本建立驗(yàn)證。用戶若需檢測(cè)其他目的轉(zhuǎn)錄本,需自行建立相應(yīng)的性能特征。
Q15:離心時(shí)有什么限制?
A:離心速度請(qǐng)勿超過10,000 × g。過高的離心速度(超過10,000 RCF)可能導(dǎo)致PAXgene管破裂,造成血液暴露和潛在傷害。
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,主打一個(gè)抽象自嘲,“嗎嘍”“裝死者”“ATM-er”各種標(biāo)簽刷屏朋友圈,堪稱當(dāng)代打工人的精神嘴替!
作為實(shí)驗(yàn)室搬磚人,每天和BD采血管貼貼,突然靈光一閃——要是咱們實(shí)驗(yàn)室的“顯眼包”BD采血管去測(cè)SBTI,會(huì)測(cè)出什么炸裂人格?今天就來整活,帶大家解鎖BD采血管的隱藏“管”格,順便蹲一蹲和你同人格的那根“管”,華雅生物BD現(xiàn)貨速發(fā),不用等貨,測(cè)完直接沖!
話不多說,前方高能!BD采血管SBTI人格對(duì)照表新鮮出爐,快對(duì)號(hào)入座
(嚴(yán)肅提醒:梗歸梗,產(chǎn)品信息絕對(duì)精準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)室人放心抄作業(yè)?。?/p>
BD采血管SBTI人格大賞(附貨號(hào)+用途,干貨拉滿)搞怪人格:嗎嘍打工人(Malo)——“人生是副本,我只是一只猴,默默干活不喊累”
純純“三無”好管子(無添加劑、無花活、無脾氣),主打一個(gè)無私奉獻(xiàn),像極了實(shí)驗(yàn)室里默默搬磚的嗎嘍打工人
。日常負(fù)責(zé)常規(guī)生化血清檢驗(yàn),不管是肝功能、腎功能還是電解質(zhì)檢測(cè),它都能穩(wěn)穩(wěn)hold住,不搞特殊化,不耍小脾氣,只要你需要,它就安安靜靜待在那里,把血清乖乖分離出來,不添亂、不偷懶,妥妥的實(shí)驗(yàn)室“底層支柱”,性價(jià)比拉滿!
搞怪人格:老好人調(diào)停者(Mediator)——“看透一切但不拆穿,中間隔離誰也不得罪”
實(shí)驗(yàn)室的“和平使者”非它莫屬!管內(nèi)含有惰性分離膠和促凝劑,堪稱“社交nb癥”天花板(不是)。采血后能快速促凝,離心后分離膠直接站在中間,把血清和血細(xì)胞分得明明白白,互不打擾、互不越界
,避免“鄰里矛盾”,讓后續(xù)檢驗(yàn)更精準(zhǔn)。不管是常規(guī)生化還是免疫檢測(cè),它都能從容應(yīng)對(duì),既照顧到血清的純度,又保護(hù)血細(xì)胞不被破壞,主打一個(gè)“一碗水端平”,誰見了都得說一句“絕絕子”!
搞怪人格:強(qiáng)迫癥控制狂(Controller)——“精確到發(fā)絲,絕不允許一絲差錯(cuò)”
重度強(qiáng)迫癥患者實(shí)錘!專門負(fù)責(zé)凝血四項(xiàng)檢測(cè)(凝血酶原時(shí)間、凝血酶時(shí)間等),管內(nèi)枸櫞酸鈉抗凝劑濃度精準(zhǔn)到0.109M,采血比例絲毫不容偏差,多一滴少一滴都能讓它“CPU燒了”
。它的底線就是:絕不允許血液提前凝固,絕不允許檢測(cè)結(jié)果有偏差,全程嚴(yán)格把控每一個(gè)細(xì)節(jié),像極了上班時(shí)盯著報(bào)表、連標(biāo)點(diǎn)符號(hào)都要改三遍的控制狂,有它在,凝血檢測(cè)的準(zhǔn)確性直接拉滿!
搞怪人格:細(xì)節(jié)控藝術(shù)家(Artist)——“把每個(gè)細(xì)胞都寵成藝術(shù)品,吹毛求疵到極·致”
實(shí)驗(yàn)室的“顏值控+細(xì)節(jié)怪”,主打一個(gè)“精致到骨子里”!專門用于血常規(guī)檢測(cè),管內(nèi)EDTA抗凝劑能牢牢保護(hù)細(xì)胞形態(tài),不讓紅細(xì)胞、白細(xì)胞“變形走樣”,哪怕是最細(xì)小的細(xì)胞碎片,它都能細(xì)心呵護(hù)
。就像顯微鏡下的藝術(shù)家,對(duì)每一個(gè)細(xì)胞都吹毛求疵,力求呈現(xiàn)最真實(shí)、最完整的細(xì)胞狀態(tài),醫(yī)生靠它判斷血常規(guī)指標(biāo),簡直是“火眼金睛”的好幫手,細(xì)節(jié)控直接狂喜!
搞怪人格:急急國王(Speedster)——“風(fēng)風(fēng)火火,拒絕磨嘰,主打一個(gè)速戰(zhàn)速?zèng)Q”
實(shí)驗(yàn)室的“急性子顯眼包”,急脾氣星人實(shí)錘!專門用于急診生化、血漿測(cè)定,管內(nèi)肝素抗凝劑能快速抗凝,不需要漫長等待,采血后就能快速處理樣本,適配急診“與時(shí)間賽跑”的節(jié)奏
。最討厭磨磨蹭蹭,別人還在慢悠悠促凝,它已經(jīng)搞定血漿分離,堪稱“急診救星”,像極了上班趕地鐵、下班沖外賣的急急國王,主打一個(gè)“高效、快速、不拖更”!
搞怪人格:時(shí)間凍結(jié)者(Time Freezer)——“管他滄海桑田,我的血糖必須原地封存”
自帶“時(shí)間靜止”buff的狠角色!專門用于血糖檢測(cè),管內(nèi)草酸鉀抗凝+氟化鈉抑糖,雙重保障能讓血糖濃度在室溫下保持24小時(shí)穩(wěn)定,不降解、不變化,主打一個(gè)“歲月靜好,我自不變”
。就像能凍結(jié)時(shí)間的魔法師,不管外界溫度怎么變,不管樣本放多久,血糖數(shù)值始終精準(zhǔn)如一,再也不用擔(dān)心樣本放置太久導(dǎo)致檢測(cè)不準(zhǔn),糖尿病患者的“福音管”,時(shí)間凍結(jié)者名不虛傳!
搞怪人格:碎片收藏家(Collector)——“易碎品守護(hù)者,科研界的拼圖高手”
溫柔又強(qiáng)大的“寶藏管子”,專門負(fù)責(zé)穩(wěn)定和保護(hù)RNA,主打一個(gè)“護(hù)犢子”!RNA有多脆弱,懂的都懂,稍微折騰就會(huì)降解,而它就像細(xì)心的碎片收藏家,能把脆弱的RNA保護(hù)得嚴(yán)嚴(yán)實(shí)實(shí),不被破壞、不被降解
,為分子診斷、PCR檢測(cè)保駕護(hù)航。不管是科研實(shí)驗(yàn)還是臨床檢測(cè),有它在,RNA樣本就能穩(wěn)穩(wěn)留存,堪稱科研界的“拼圖高手”,把破碎的RNA碎片拼成完整的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),誰能不愛?
重點(diǎn)來了!實(shí)驗(yàn)室人必看!測(cè)完了BD采血管的SBTI人格,是不是已經(jīng)找到和你同頻的那根“管”?別著急沖,重點(diǎn)劃重點(diǎn)——
華雅生物,是BD品牌中國區(qū)正規(guī)代理商!文中所有型號(hào)BD采血管,我們均有現(xiàn)貨供應(yīng),無需漫長等待,不用蹲貨、不用催單,下單即發(fā),實(shí)驗(yàn)室補(bǔ)貨再也不用慌!
不管你需要“嗎嘍打工人”紅色血清管(367812),還是“急急國王”綠色肝素管(368480),亦或是“時(shí)間凍結(jié)者”灰色血糖管(367933),華雅生物一站式配齊,正品保障、價(jià)格給力!
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2.移除頂層的泡沫墊層,露出Gateway設(shè)備及其電源線。
3.輕輕從包裝中取出Gateway主機(jī)和充電器,同時(shí)請(qǐng)務(wù)必穩(wěn)固托住設(shè)備底部。
4.檢查所有組件是否有可見損壞或缺失。如發(fā)現(xiàn)任何問題,請(qǐng)先聯(lián)系技術(shù)支持后再繼續(xù)操作。
后動(dòng)Gateway
1.請(qǐng)將Gateway設(shè)備放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)或生物安全柜內(nèi)(根據(jù)您的工作空間要求決定)。
2搬運(yùn)設(shè)備時(shí),請(qǐng)單手握住拱形手提部位,另一只手托住基座進(jìn)行支撐。
3.將電源線插入標(biāo)準(zhǔn)電源插座。
4.將電源線另一端連接至Gateway側(cè)面的電源接口。
5.將電源開關(guān)撥至“ON”開后位置。
a.您將聽到設(shè)備開始加壓時(shí)內(nèi)部泵后動(dòng)的聲音。
b.當(dāng)內(nèi)部壓力達(dá)到壓力表設(shè)定值時(shí),啟動(dòng)鈕將亮起指示燈。
操作說明
1.設(shè)定系統(tǒng)壓力
a.轉(zhuǎn)動(dòng)位于Gateway設(shè)備側(cè)面的壓力調(diào)節(jié)旋鈕,即可設(shè)定所需壓力值。
b.請(qǐng)觀察設(shè)備正面的壓力表,確認(rèn)已達(dá)到設(shè)定壓力值;等待系統(tǒng)完成加壓過程。
2.準(zhǔn)備樣本收集區(qū)域
a.將開口的1.5毫升收集管放入管架中。
b.將管蓋插入管架側(cè)面的蓋槽中;注意避免觸碰管蓋內(nèi)部,以保持無菌狀態(tài)。
3.準(zhǔn)備Microbooster
a.請(qǐng)確認(rèn)Microbooster耗材的孔徑規(guī)格符合您的實(shí)驗(yàn)要求。
b.請(qǐng)小心撕開Microbooster耗材包裝:從頂部將紙質(zhì)與塑料封層分離揭開。
C.請(qǐng)確認(rèn)方向無誤后,將Microbooster耗材輕輕旋轉(zhuǎn)擰入基座上的鎖扣連接口。
d.請(qǐng)確保Microbooster耗材安裝牢固,但避免過度擰緊。
4.調(diào)整管架位置
a.向上拉動(dòng)管架直至其完全升起,使收集管正好位于Microbooster輸出噴嘴的正下方。
5.開始實(shí)驗(yàn)
a.請(qǐng)確認(rèn)壓力表讀數(shù)仍處于預(yù)設(shè)壓力值,如有需要請(qǐng)調(diào)節(jié)旋鈕。
b.當(dāng)啟動(dòng)鈕指示燈亮起時(shí),請(qǐng)按住按鈕開始實(shí)驗(yàn)。
C.請(qǐng)持續(xù)按住啟動(dòng)鈕,直至所有組分完全通過Microbooster耗材并轉(zhuǎn)移至1.5毫升收集管內(nèi)。
6 .結(jié)束流程
a.請(qǐng)輕輕向下按壓試管架,使其回歸初始位置。
b.請(qǐng)沿逆時(shí)針方向輕輕旋松Microbooster,將其從Gateway設(shè)備上分離。
c.請(qǐng)從蓋槽中取出管蓋,并將其牢固地蓋回收集管上。
d.請(qǐng)從試管架中取出1.5毫升收集管。
7.關(guān)閉電源
a.請(qǐng)將電源開關(guān)撥至”關(guān)閉”(OFF)位置以關(guān)閉設(shè)備。
市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|(zhì)。并且為節(jié)節(jié)攀高的胎牛血清價(jià)格頭疼不已?還在為時(shí)不時(shí)斷貨而苦惱?還在糾結(jié)用澳洲產(chǎn)血清還是新西蘭源血清?如今,大部分實(shí)驗(yàn)室都還在用胎牛血清或新生牛血清來培養(yǎng)細(xì)胞,但是隨著全球胎牛血清血源地減少以及胎牛血清價(jià)格的不斷上漲,以及來自動(dòng)物保護(hù)組織的壓力,很多實(shí)驗(yàn)室尤其是干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室開始嘗試使用血清替代物來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),這種趨勢(shì)從發(fā)達(dá)國家美國歐洲開始,他們的實(shí)驗(yàn)室很多都已經(jīng)進(jìn)行了很多年的血清替代物細(xì)胞培養(yǎng)。隨著亞洲尤其是中國科研經(jīng)費(fèi)的充足以及干細(xì)胞研究的興起,國內(nèi)的無血清細(xì)胞培養(yǎng)也蔚然成風(fēng)。
2005年首次報(bào)道人血小板裂解物(HPL)可以代替胎牛血清用于MSCs的大規(guī)模培養(yǎng)和制備,能滿足臨床應(yīng)用的需求。
隨后有一系列的文章證明HPL能起到FBS的功能,促進(jìn)MSCs的增殖擴(kuò)增。這種高效的細(xì)胞增殖刺激使MSCs能夠在11-16天的單個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi)進(jìn)行大規(guī)模的臨床應(yīng)用,而不需要進(jìn)一步的傳代,同時(shí)保持基因組的穩(wěn)定性。
Ultroser G 血清替代品(Ultroser G serum substitute),是美國Pall公司專門針對(duì)生物治療、再生醫(yī)學(xué)、規(guī)模化哺動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等過程中替代胎牛血清FBS研發(fā)而成,由Pall法國分公司生產(chǎn),原裝進(jìn)口中國。
Ultroser G血清替代品具有25余年的應(yīng)用歷史,自上市以來,受到歐洲和美國眾多科研人員的一致認(rèn)可,在NCBI和ELSEVIER可搜索到近1000篇相關(guān)文獻(xiàn)。隨著全球胎牛血清價(jià)格的不斷上漲、干細(xì)胞研究的廣泛開展、以及國內(nèi)科研經(jīng)費(fèi)的增加,越來越多的實(shí)驗(yàn)室開始使用UltroserG 血清替代品進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
2.美國上市公司頗爾,國際生命科學(xué)領(lǐng)導(dǎo)品牌,20多年的產(chǎn)品應(yīng)用歷史,得到美國和歐洲科學(xué)家的一致認(rèn)可;
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果已經(jīng)得到證明,在主流文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫中可以搜索到上千篇發(fā)表的文獻(xiàn);
4.生物活性是血清的5倍;
5.干粉狀包裝,易儲(chǔ)存;
6.組分的一致性,批次的穩(wěn)定性,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性提高;
7.恒定不變的生物活性;
8.更長的保質(zhì)期,從生產(chǎn)日期起4年;
9.兼容市場主流細(xì)胞培養(yǎng)基;
10.消除血清帶來的血紅蛋白,內(nèi)毒素,瘋牛病等潛在不穩(wěn)定因素影響;
PALL?15950-017血清替代品原瓶原裝進(jìn)口中國。PALL血清替代品專門針對(duì)疫苗生產(chǎn)、抗體制備、細(xì)胞治療、規(guī)模化動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)研制而成,具有活性高、批次一致的核心優(yōu)勢(shì)。
PALL?15950-017血清替代品血清替代品屬于半固定成分,相對(duì)于動(dòng)物制品的胎牛血清,具有多方面的產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

訂購信息:
| 品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品信息 | 包裝規(guī)格 |
| PALL | 15950-017 | 血清替代物 | 20ML |
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實(shí)驗(yàn)方法:
L-谷氨酰胺和Gibco
慶大霉素(不完全培養(yǎng)基)。
Dynabeads
mRNA DIRECT
純化試劑盒分離來自T細(xì)胞的RNA,并使用Ion AmpliSeq
試劑盒通過TCRβ測(cè)序?qū)ζ溥M(jìn)行分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠不需要上游T細(xì)胞選擇,因?yàn)樵摷夹g(shù)基于CD3和CD28共表達(dá)同時(shí)分離和激活初始和早期記憶T細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示CD3+ CD28+ T細(xì)胞被分離,恢復(fù)率高(>90%)(圖2)。在激活后第3天,細(xì)胞被均勻刺激(>95% CD25+)并具有高純度(>95% CD3+)(圖3)。

(CTS Dynabeads CD3/CD28優(yōu)先分離CD3+ CD28+ 細(xì)胞。將PBMC與CTS Dynabeads CD3/CD28以3:1磁珠:細(xì)胞的比例孵育30分鐘,并分析陰性(非分離)級(jí)分并用于計(jì)算分離效率。A代表性細(xì)胞圖,證明CD3+ CD28+ T細(xì)胞分離的效率。B恢復(fù)實(shí)驗(yàn)總結(jié)(n = 9)。)

(用CTS Dynabeads CD3/CD28分離的T細(xì)胞被均勻刺激且具有高純度。(A,B)在分析活化標(biāo)記物之前,將分離的T細(xì)胞擴(kuò)增3天。(C,D)在第0天(起始材料)和激活后第3天和第10天分析T細(xì)胞純度。)

(T細(xì)胞擴(kuò)增后克隆多樣性增加。用CTS Dynabeads CD3/CD28分離并活化T細(xì)胞。(A)在第0,3和10天,收獲樣品用于TCRβ測(cè)序。(B)在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中,在激活后第3天也用γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞。)
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
相關(guān)產(chǎn)品推薦
品牌? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 貨號(hào)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?名稱
Gibco
? ? ? ? ? ? ? ? ? ??40203D? ? ? ? ? ? ??CTS
(Cell Therapy Systems) Dynabeads
CD3/CD28
Gibco
? ? ? ? ? ? ? ? ? ??11161D? ? ? ? ? ? ? ? Dynabeads
Human T-Activator CD3/CD28 for T Cell Expansion and Activation
BioGems? ? ? ? ? ? ? ? ?05121-25? ? ? ? ? ? ?Anti-Human CD3 SAFIRE Purified
]]>原理:對(duì)分離的單個(gè)細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得高覆蓋率的完整的基因組后進(jìn)行高通量測(cè)序,廣泛應(yīng)用于癌癥研究、胚胎發(fā)育、輔助生殖、細(xì)胞分化、免疫機(jī)制、微生物等方向的研究。
獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物是準(zhǔn)確全面的測(cè)序結(jié)果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無偏好性的擴(kuò)增,在單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)誕生的近二十年時(shí)間里,全基因組擴(kuò)增技術(shù)經(jīng)歷了幾次重大的變革。
WGA主要有三種方式:DOP-PCR,MDA,MALBAC。
下面小編就來為大家介紹一下WGA技術(shù)的演變歷程,以及怎樣根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇相應(yīng)的擴(kuò)增方式。
DOP-PCR (Degenerate Oligonucleotide–Primed Polymerase Chain Reaction)
技術(shù)原理:簡并寡核苷酸引物PCR,引物的3′?含6bp的隨機(jī)序列,可以隨機(jī)的和基因組DNA結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)全基因組的擴(kuò)增。
應(yīng)用范圍:因?yàn)镻CR的指數(shù)擴(kuò)增特性,放大了基因組上不同序列之間的差異,因而導(dǎo)致擴(kuò)增出的基因組覆蓋度較低。盡管如此,在1M bin size的水平上,DOP-PCR適合對(duì)染色體的CNV進(jìn)行定量。
商品化試劑盒:Sigma-Aldrich, GenomePlex Single Cell Whole Genome Amplification Kit。

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? MDA (Multiple Displacement Amplification)
技術(shù)原理:2001年由Laskin團(tuán)隊(duì)發(fā)明,使用隨機(jī)的六聚體引物和φ29DNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng),該聚合酶具有很強(qiáng)的鏈置換特性,能夠在等溫的條件下,擴(kuò)增產(chǎn)生50~100kb的核酸片段。同時(shí)由于其3’-5’核酸外切酶活性和校對(duì)活性,φ29 DNA聚合酶具有很高的復(fù)制保真性。應(yīng)用范圍:MDA法比DOP-PCR擁有更高的基因組覆蓋度,φ29 DNA聚合酶的高效率及高保真性,使得MDA法在對(duì)SNV的分析,以及構(gòu)建大片段文庫上有著顯著優(yōu)勢(shì)。但是,和DOP-PCR相同,MDA法依然是指數(shù)擴(kuò)增,因此依然存在PCR反應(yīng)的序列偏好性,然而,和DOP-PCR不同的是,這種偏好性并不能重復(fù),因此MDA法不適合進(jìn)行CNV的分析。
商品化試劑盒:Qiagen,?REPLI-g?Single?Cell?Kit。?

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? MALBAC (Multiple Annealing and Looping–Based Amplification Cycles)
技術(shù)原理:2012年由謝曉亮團(tuán)隊(duì)發(fā)明,擬線性的擴(kuò)增過程降低了指數(shù)擴(kuò)增的序列偏好性。擴(kuò)增引物的5’含有27bp的共同序列,3’是8bp的隨機(jī)序列,可以和模板在15~20℃的低溫下結(jié)合,經(jīng)過8~12個(gè)循環(huán)的擬線性擴(kuò)增后,再對(duì)這些環(huán)狀的擴(kuò)增子進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增。應(yīng)用范圍:MALBAC法的優(yōu)勢(shì)在于,雖然它依然存在一定的序列偏好性,但和MDA不同,MALBAC的這種偏好性在不同的細(xì)胞之間是可重復(fù)的,因此可以通過對(duì)參考細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)化后,進(jìn)行CNV的分析;另外,由于其擴(kuò)增的均一性,MALBAC法擴(kuò)增的等位基因敲除率更低。MALBAC的弱點(diǎn)在于,它使用的聚合酶保真性不如φ29,因此MALBAC在檢測(cè)SNV時(shí)將會(huì)出現(xiàn)更多的假陽性;另外,由于它可重復(fù)性的序列偏好性,基因組上低擴(kuò)增的區(qū)域有時(shí)會(huì)在擴(kuò)增過程中丟失。
商品化試劑盒:Yikon, Single Cell Whole Genome Amplification Kit; Rubicon, PicoPLEX WGA Kit。

由上述的分析可見,MDA和MALBAC各有優(yōu)劣,實(shí)際上在不同的文獻(xiàn)中,研究者也會(huì)根據(jù)研究目的的不同,采取不同的方式對(duì)基因組進(jìn)行擴(kuò)增,以滿足研究的需要。
PicoPLEX??WGA Kit:用于單細(xì)胞文庫構(gòu)建的全基因組擴(kuò)增解決方案
PicoPLEX??DNA-seq Kit:單細(xì)胞 DNA 文庫制備技術(shù),適用于 Illumina 所有 NGS 測(cè)序平臺(tái)
ThurPLEX??DNA-seq Kit:更高的通量, 更好的性能, 用于所有 Illumina 的 NGS 平臺(tái)
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| 品牌 | 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| Rubicon | R300381 | PicoPLEX DNA-seq Kit | 48 |
| Rubicon | R300672 | SMARTer? PicoPLEX? Single Cell WGA Kit | 96 |
| Rubicon | R300722 | PicoPLEX Single Cell WGA Kit v3 | 96 |
| Rubicon | R400407 | ThruPLEX DNA-seq 96D Kit | 96 |
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全球和中國干細(xì)胞總體趨勢(shì)對(duì)比分析
隨著申請(qǐng)量的上升,授權(quán)量也 相應(yīng)上升,但授權(quán)率近年來沒有太大波動(dòng),基本維持 在30%—40%之間細(xì)胞技術(shù)越來越受到重視,目前已進(jìn)入快速生長期。此外,中國干細(xì)胞的授權(quán)率基本維持在40%—50%之間,高于全球10個(gè)百分點(diǎn)。

全球(左)和中國(右)專利技術(shù)
從圖中全球干細(xì)胞技術(shù)生命周期分析中可以看出,干細(xì)胞技術(shù)一直處于線性上升趨勢(shì),平均斜率為2.7左右,說明干細(xì)胞技術(shù)現(xiàn)在仍處于發(fā)展階段,2001年之前的20年生長緩慢, 2001年之后的20年快速增長,這與全球干細(xì)胞總體趨勢(shì)一致。
全球干細(xì)胞申請(qǐng)量位居前二十位的國家/地區(qū),對(duì)干細(xì)胞的地域分布情況進(jìn)行分析。

各國家/地區(qū)的申請(qǐng)來看,美國申請(qǐng)5 418件居首位,研究機(jī)構(gòu)及私人企業(yè)的重點(diǎn)研發(fā),使其成為全球干細(xì)胞的領(lǐng)導(dǎo)者;中國和世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織緊隨其后,分別為4 843件和4 094件,中國政府近幾年加大了干細(xì)胞的研究投入,并將其納入“十三五”國家規(guī)劃和“健康中國2030”綱要;歐洲專利局、日本和韓國位列第三、第四和第五,日本的京都大學(xué)和韓國的首爾國立大學(xué)在干細(xì)胞技術(shù)研究上投入較大,并取得了豐碩的成果。
全球和中國干細(xì)胞主要競爭者
從全球近十年獲得干細(xì)胞發(fā)明專利授權(quán)的機(jī)構(gòu)中選取前十位,如圖。從機(jī)構(gòu)性質(zhì)上看,7家為科研院校,3家為上市公司;從國家分布上看,美國占7名,日本、韓國、中國各占1名??傮w來說,各機(jī)構(gòu)的授權(quán)量都呈上升趨勢(shì)。





總體來看,近十年全球和中國都重點(diǎn)關(guān)注間充質(zhì)干細(xì)胞和多能干細(xì)胞,包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等,不同點(diǎn)是全球還關(guān)注造血干細(xì)胞和干細(xì)胞制藥,中國關(guān)注神經(jīng)干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞等。對(duì)比前五年(2008—2012年)與后五年(2013—2017年),全球關(guān)于核酸下降,生長因子和造血干細(xì)胞上升,中國關(guān)于多能干細(xì)胞和干細(xì)胞營養(yǎng)液下降,生長因子上升。

中國關(guān)注神經(jīng)干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞,且近五年的研究重點(diǎn)增加了抗腫瘤藥和治療傷口、潰瘍、燒傷、疤痕、疙瘩等藥物,說明中國干細(xì)胞研究方向逐漸偏向抗腫瘤和創(chuàng)傷整形等方面。全球?qū)υ煅杉?xì)胞和干細(xì)胞制藥研究較多,但中國在此方面相對(duì)較少,今后可加大該方面的研究。
說了那么多,小編給大家推薦一波干細(xì)胞研究產(chǎn)品,干細(xì)胞藥企推薦哦!
| 品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品信息 |
| HY STEMCELL | HX0201M | CCGmHuMTM人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,成分確定、無血清、無異源物 |
| Corning | 88-600-CV | MSC xeno-free SFM |
| Lifeline | LL-0062 | 骨髓MSC完全培養(yǎng)基套裝 |
| Lifeline | LL-0034 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝 |
| Lifeline | LL-0073 | NSC+纖連 蛋白 細(xì)胞培養(yǎng)基套裝 |
| Lifeline | ?LL-0070 | NSC 培養(yǎng)基套裝 |
| Lifeline | LL-0062 | 骨髓MSC完全培養(yǎng)基套裝 |
| Lifeline | LL-0034 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝 |
| LONZA | BEBP12-725F | UltraCULTURE Serum-free Medium無血清培養(yǎng)基,比利時(shí) |
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? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?華雅思創(chuàng)生物
近日,某醫(yī)院有一老年病例,因吃炸醬面時(shí)不小心吸入了一粒肉醬后幾天開始發(fā)燒,咳嗽,呼吸困難入院,導(dǎo)致吸入性肺炎!后來經(jīng)過檢測(cè)治療發(fā)現(xiàn)為金黃色葡萄球菌肺炎,其痰培養(yǎng)示金黃色葡萄球菌證實(shí)吸入性金黃色葡萄球菌肺炎診斷。看來是患者在進(jìn)食時(shí)吸入了一粒帶有金黃色葡萄球菌的肉醬,而引發(fā)的肺炎!
什么一粒肉醬竟會(huì)導(dǎo)致這么嚴(yán)重的后果?什么是金黃色葡萄球菌?

金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人類的一種重要病原菌,隸屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus),有”嗜肉菌”的別稱,是革蘭氏陽性菌的代表,可引起許多嚴(yán)重感染。而對(duì)于金黃色葡萄球菌在速凍食品中的存在量,衛(wèi)生部于2011年11月24日公布食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《速凍面米制品》,允許金葡菌限量存在。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一種具有較強(qiáng)攻擊性的常見人類病原菌,隸屬于葡萄球菌屬,可引起多種醫(yī)院感染和社區(qū)感染性疾病,輕者引起化膿性皮膚感染,嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致各種危及生命的并發(fā)癥,如菌血癥和心內(nèi)膜炎。金黃色葡萄球菌在環(huán)境中分布廣泛,對(duì)外界不利環(huán)境如干燥、低溫等有較強(qiáng)的抵抗能力,極易通過各種途徑污染食品,會(huì)引發(fā)金黃色葡萄球菌食物中毒(S.aureus food poisoning,SFP),對(duì)食品安全和人類健康造成重大威脅。當(dāng)金黃色葡萄球菌污染食品后,會(huì)在適宜的環(huán)境條件下大量繁殖,與此同時(shí)分泌各種毒素或毒力因子,如金黃色葡萄球菌腸毒素(Staphylococcal enterotoxins,SE),大大增加了其侵襲性和致病力。
根據(jù)美國疾病預(yù)防控制中心的研究報(bào)道,每年在美國由金黃色葡萄球菌導(dǎo)致的食物中毒約有24萬人次,其中1000多人需要住院治療并約10人因此死亡,由該菌引起的食物中毒占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒的33%;在加拿大,這個(gè)比例高達(dá)45%同。我國每年也會(huì)發(fā)生多起該類食品安全事件,給醫(yī)療衛(wèi)生造成巨大壓力。
金黃色葡萄球菌感染危害
當(dāng)身體被金黃色葡萄球菌感染的時(shí)候,體內(nèi)的白細(xì)胞會(huì)有所下降,從而導(dǎo)致機(jī)體的抵抗力下降,增加患病的風(fēng)險(xiǎn)。
當(dāng)天氣炎熱的時(shí)候,食物易發(fā)生變質(zhì),產(chǎn)生大量的金黃色葡萄球菌,從而引起金黃色葡萄球菌感染癥狀,導(dǎo)致出現(xiàn)食物中毒的現(xiàn)象,引起機(jī)體產(chǎn)生一些惡心、嘔吐、頭暈等食物中毒反應(yīng),嚴(yán)重的可能會(huì)出現(xiàn)暈厥的現(xiàn)象。
金黃色葡萄球菌對(duì)皮膚也會(huì)造成傷害,引起皮膚出現(xiàn)潰爛化膿的現(xiàn)象,如果傷口處被金黃色葡萄球菌感染,會(huì)使傷口擴(kuò)散,加重病情,延長傷口的愈合時(shí)間,身體出現(xiàn)嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),引起發(fā)熱,惡心等現(xiàn)象。如果血液中含有金黃色葡萄球菌,經(jīng)過大腦后,嚴(yán)重會(huì)引起腦膜炎,輕者出現(xiàn)頭痛、發(fā)熱、惡心嘔吐等不適癥狀,重者還會(huì)出現(xiàn)休克的現(xiàn)象,需要立即搶救才可以。
另外,金黃色葡萄球菌感染后還可能會(huì)出現(xiàn)其它方面的疾病,比如引起腸炎、肺炎、心內(nèi)膜炎等,還可能會(huì)引起中毒性的休克、敗血癥等嚴(yán)重后果,因此,大家日常需要注意做好個(gè)人的衛(wèi)生工作,勤加鍛煉,提高身體的免疫力和抵抗能力。
相關(guān)事件
北京市工商局2011年10月19日查出思念牌的三鮮水餃含有金黃色葡萄球菌。
新快報(bào)2011年11月4日?qǐng)?bào)道,廣州市工商局公布2011年第三季度三類食品質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果,“三全”以及“海霸王”的三款速凍食品也都被驗(yàn)出含有金黃色葡萄球菌,分別是“三全灌湯水餃(豬肉玉米蔬菜)”、“三全灌湯水餃(三鮮)”以及“海霸王經(jīng)典包心魚丸”。
2012年1月,媒體報(bào)道,爺爺因親吻三代單傳的孫子致其感染金黃色葡萄球菌而得敗血癥,最終不治死亡。
控制方法
金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測(cè)主要有動(dòng)物試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附等方法。
防止帶菌人群對(duì)各種食物的污染,需要定期對(duì)生產(chǎn)加工人員進(jìn)行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時(shí)停止其工作或調(diào)換崗位。
防止金黃色葡萄球菌對(duì)奶及其制品的污染,牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房,不能擠用患化膿性乳腺炎乳牛的牛奶;奶擠出后,要迅速冷至-10℃以下,以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料,注意低溫保存。對(duì)肉制品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位,經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)。
防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成,應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6h,并且食用前要徹底加熱。
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2019年底突如其來的新型冠狀病毒,讓我們?cè)俅握J(rèn)識(shí)到了廣泛分布且種類繁多的病原微生物對(duì)人類的威脅。面對(duì)一場突如其來的疫情,既要采用科學(xué)的手段快速發(fā)現(xiàn)并認(rèn)識(shí)病原微生物,同時(shí)也要基于科學(xué)的認(rèn)識(shí)制定可行的臨床檢測(cè)和治療方案。新興的高通量基因測(cè)序技術(shù)通過直接對(duì)病毒基因組進(jìn)行全面分析,對(duì)于2019-nCoV的首先確認(rèn)、動(dòng)態(tài)分析、進(jìn)化來源以及致病機(jī)制、傳播途徑研究等具備了無可比擬的優(yōu)勢(shì)。
作為分子生物學(xué)領(lǐng)域的行業(yè)領(lǐng)導(dǎo)者,QIAGEN旗下多款經(jīng)典病毒核酸純化試劑盒就以其回收率高、核酸純度高、多樣本兼容性的優(yōu)勢(shì)在2019-nCoV實(shí)驗(yàn)檢測(cè)環(huán)節(jié)中 做好準(zhǔn)備。同時(shí)QIAGEN提供了基于不同技術(shù)和方法的檢測(cè)方案,包括高通量測(cè)序技術(shù)方案。

除了新型冠狀病毒外,近年來造成人類感染的病原微生物也日益復(fù)雜,同時(shí)抗菌藥物濫用與細(xì)菌耐藥已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn)。如今,高通量測(cè)序已經(jīng)迅速成為臨床實(shí)驗(yàn)室的重要檢測(cè)平臺(tái),延展并提高了經(jīng)典微生物方法的檢測(cè)能力,
病毒核酸全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增
實(shí)際的檢測(cè)過程中可能拿到的并非都是最佳樣本,如來自上呼吸道的咽拭子就因其自身病毒含量低而極易造成檢測(cè)假陰性。面對(duì)這樣的現(xiàn)實(shí)困境,我們?cè)谔岣吆怂岙a(chǎn)量、質(zhì)量的同時(shí),也可以借助 “全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增技(WTA)”技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行均等的放大,解決樣本量不足的難題。
基于QIAGEN充分優(yōu)化改良的 “多重置換擴(kuò)增(MDA)”技術(shù),REPLI-g WTA Single Cell能夠針對(duì)單個(gè)細(xì)胞或pg級(jí)純化RNA進(jìn)行快速的全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增。區(qū)別于傳統(tǒng)PCR類擴(kuò)增方法,REPLI-g可在等溫條件下進(jìn)行均等、高保真的高靈敏度擴(kuò)增,雙鏈cDNA產(chǎn)物非常適用于下游進(jìn)行高通量測(cè)序(二代或三代測(cè)序)、PCR等方法檢測(cè),也多次被運(yùn)用于類似疫情的檢測(cè)方案中,如在2014年西非埃博拉病毒以及2016年中國南方的寨卡病毒疫情方案中,來自中國疾控中心、廣東省疾控中心等單位的研究人員就已將REPLI-g應(yīng)用在對(duì)抗疫情的實(shí)戰(zhàn)中。

人源等宿主rRNA去除
疫情檢測(cè)所采用的樣本絕大多數(shù)來自呼吸道、血液等,純化后的核酸產(chǎn)物中還存在著大量的人源RNA,占用大量數(shù)據(jù)的同時(shí)還會(huì)對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生潛在影響。通過對(duì)測(cè)序的結(jié)果進(jìn)行分析,我們可看到人源rRNA序列占比極高,因此我們可以通過去除人源rRNA等手段來部分解決這一問題。此時(shí),又到了QIAseq FastSelect展現(xiàn)其真正實(shí)力的時(shí)候了!
借助獨(dú)特的“黑科技”,僅需通過簡單的1步加樣以及一段程序性降溫孵育,無需任何純化步驟,便能在14分鐘內(nèi)完成樣品中人源或其他哺乳動(dòng)物來源rRNA的高效去除。這一過程可與REPLI-g WTA Single Cell Kit以及幾乎所有其他的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、RNA建庫試劑盒相兼容,在避免因多步純化而造成病毒核酸損失的同時(shí),還可極為快速地完成rRNA去除這一限速步驟。此外,如果在糞便、肛拭子等樣本中存在較多的細(xì)菌組分,我們也同樣可以利用QIAseq FastSelect 5S/16S/23S Kit結(jié)合QIAseq FastSelect HMR Kit在一步流程中同時(shí)完成全部細(xì)菌和宿主rRNA的去除,十分便捷。
產(chǎn)品名稱 ?????????貨號(hào)
QIAseq FastSelect -rRNA & -Globin HMR Kit???334386
NGS文庫構(gòu)建
在完成rRNA去除并對(duì)RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(含二鏈合成)后,一款高效的建庫試劑盒是完成cDNA樣品文庫構(gòu)建的測(cè)序前關(guān)鍵步驟。KAPA?KK8514 DNA HyperPlus文庫構(gòu)建試劑盒
貨號(hào):KK8514,整合了DNA酶切片段化及文庫構(gòu)建步驟,所有反應(yīng)均在一管中完成。酶切片段化可以降低DNA末端損傷,尤其對(duì)于FFPE DNA更是如此。

貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
KK8514 KAPA DNA HyperPlus?文庫構(gòu)建試劑盒,含擴(kuò)增 96?次
KK8512 KAPA DNA HyperPlus?文庫構(gòu)建試劑盒,含擴(kuò)增 24次
KK8513 KAPA DNA HyperPlus?文庫構(gòu)建試劑盒,PCR-Free 24?次
KK8515 KAPA DNA HyperPlus?文庫構(gòu)建試劑盒,PCR-Free 96?次
過去幾周來自中國疾控等單位的科學(xué)家在其研究中也分別采用了QIAGEN樣本制備(QIAamp Viral RNA Mini Kit,貨號(hào):52904)等解決方案進(jìn)行了冠狀病毒的測(cè)序和基因組分析并相繼發(fā)表在國際頂尖雜志上。
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CIK細(xì)胞中的效應(yīng)細(xì)胞CD3+CD56+細(xì)胞在正常人外周血中極其罕見,僅1%~5%,在體外經(jīng)多因子培養(yǎng)28~30天,CD3+CD56+細(xì)胞迅速增多,較培養(yǎng)前升幅可達(dá)1000倍以上。實(shí)驗(yàn)證明,擴(kuò)增出的CD3+CD56+細(xì)胞來源于外周血中的CD3+CD56-T細(xì)胞和CD4-CD8+T細(xì)胞,而非CD3-CD56+NK細(xì)胞。比較CD3+CD56+CIK細(xì)胞中表達(dá)CD8+和CD8-的兩群細(xì)胞其殺瘤活性沒有顯著性差異,提示CIK細(xì)胞的細(xì)胞毒性與CD3CD56表達(dá)成相關(guān)趨勢(shì),而與CD8的表達(dá)未表現(xiàn)出相關(guān)性。

CIK細(xì)胞治療殺傷原理
??? CIK細(xì)胞能夠通過三種途徑殺滅腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞:
CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的直接殺傷:CIK細(xì)胞可以通過不同的機(jī)制識(shí)別腫瘤細(xì)胞,釋放顆粒酶/穿孔素等毒性顆粒,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解。
CIK細(xì)胞釋放的大量炎性細(xì)胞因子具有抑瘤殺瘤活性:體外培養(yǎng)的CIK細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子,如IFN-γ、TNF-α、IL-2等,不僅對(duì)腫瘤細(xì)胞有直接抑制作用,還可通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)反應(yīng)間接殺傷腫瘤細(xì)胞。
CIK細(xì)胞能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡:CIK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中表達(dá)FasL(Ⅱ型跨膜糖蛋白)通過與腫瘤細(xì)胞膜表達(dá)的Fas(Ⅰ型跨膜糖蛋白)結(jié)合,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。
CIK細(xì)胞治療殺瘤特點(diǎn)
1.?增殖速度快?
CIK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中加入多種細(xì)胞因子后,細(xì)胞增殖速度迅速加快,在培養(yǎng)第22天增殖曲線達(dá)頂峰,其中CD3+CD56+細(xì)胞不僅數(shù)量增加1000倍以上,且所占百分比也大幅上升,培養(yǎng)至28~30天時(shí)達(dá)平臺(tái)期,細(xì)胞毒活性亦達(dá)峰值。
2.殺瘤活性高?
CIK細(xì)胞是以CD3+CD56+T細(xì)胞為主的異質(zhì)細(xì)胞群,大量體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)CIK細(xì)胞較以NK細(xì)胞為主的LAK細(xì)胞具備更強(qiáng)大的殺瘤活性,而且其體內(nèi)殺瘤細(xì)胞毒性的維持不必依賴大劑量外源性IL-2的持續(xù)給予。體外實(shí)驗(yàn)表明CIK細(xì)胞殺傷效率更高。
3.殺瘤譜廣?
CIK細(xì)胞因沒有T淋巴細(xì)胞殺傷時(shí)的MHC限制性,故對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞系(包括K562、Hela、HL60、OCRF-CEM等)和新鮮腫瘤組織均表現(xiàn)出強(qiáng)大的殺傷活性。
4.?對(duì)多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感
CIK細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感的親本細(xì)胞和不敏感的轉(zhuǎn)化細(xì)胞均具有強(qiáng)大的殺傷活性,兩者比較無差別。
5.?殺瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制劑的影響
Mehta觀察到免疫抑制劑CsA和FK506雖然可以抑制抗CD3單抗介導(dǎo)的CIK細(xì)胞脫顆粒過程,卻不影響靶細(xì)胞誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞脫顆粒,并且CIK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷活性不會(huì)因此降低
6.?對(duì)正常骨髓造血前體細(xì)胞毒性很小
實(shí)驗(yàn)證實(shí)CIK細(xì)胞對(duì)正常髓系克隆生成幾乎沒有影響。
7.?能抵抗腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡
CIK細(xì)胞治療適應(yīng)癥
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CIK細(xì)胞治療屬于過繼細(xì)胞免疫療法,由于CIK細(xì)胞溶瘤作用是非MHC限制性的,即不受腫瘤組織類型的限制,因此對(duì)任何一種腫瘤均有殺傷作用,但對(duì)高抗原表達(dá)的癌癥療效最好,如:髓性白血病、黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性腎癌、非何杰金氏淋巴瘤等。其它癌癥如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、大腸癌等,CIK細(xì)胞治療亦有較好的療效。CIK細(xì)胞治療適用于任何一期的癌癥患者,但對(duì)早期腫瘤患者或經(jīng)過手術(shù)及放化療后腫瘤負(fù)荷較小的患者效果好。它對(duì)于手術(shù)、放化療或造血干細(xì)胞移植后患者體內(nèi)微小殘留病灶的清除,防止癌細(xì)胞擴(kuò)散和復(fù)發(fā),提高患者自身免疫力,減少毒性反應(yīng)等方面具有重要作用。某些不適合手術(shù)、不能耐受放化療的中晚期腫瘤患者,CIK細(xì)胞治療可以提高其生活質(zhì)量,延長帶瘤生存時(shí)間。
CIK細(xì)胞治療有效期
CIK細(xì)胞通過直接殺傷、分泌多種細(xì)胞因子等直接抑制腫瘤細(xì)胞生長,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等途徑起到治療作用。大多數(shù)執(zhí)行殺傷功能的細(xì)胞在回輸后立即執(zhí)行其功能,半衰期約2周至一個(gè)月?;剌?shù)募?xì)胞中包括一部分記憶細(xì)胞,可存活幾年至幾十年,當(dāng)遇到相應(yīng)刺激后,迅速在體內(nèi)活化,殺傷靶細(xì)胞。所以CIK細(xì)胞治療的療程間隔原則上為一個(gè)月,建議首先間隔一個(gè)月連續(xù)做三個(gè)療程,以后每半年做一個(gè)療程。
CIK細(xì)胞治療應(yīng)用廣泛,推薦給大家Peprotech一些好用的鑒定產(chǎn)品:
產(chǎn)品貨號(hào)??產(chǎn)品名稱
05111-20?Anti-Human CD3 Purified
10113-25?Anti-Rat CD8b SAFIRE Purified
06611-20?Anti-Human CD54 (ICAM-1) Purified
06121-20?Anti-Human CD4 Purified
84421-20?Anti-Human TNF-alpha Purified
96-200-02 Human IL-2
900-k21 ?Human IL-10 ELISA? Kit
900-k96 ??Human IL-12 ELISA Kit
900-k13Human IL-3? ELISA Kit
900-k11 ?Human IL-1α?ELISA? Kit
900-k95 ??Human IL-1β?ELISA? Kit
900-k05?Human EGF ELISA? Kit
900-k27 ??Human IFN-γ?ELISA? Kit
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