01. 貼壁VS懸浮轉染區(qū)別

02. 細胞培養(yǎng)與準備

03. 轉染操作

3.1 細胞準備

• 提前一天種板，準備貼壁細胞。
• 在96孔板中加入約2.5×10^4細胞，細胞過夜貼壁。
• 待細胞匯合度為70%-80%時，棄去培養(yǎng)基后，用Opti-MEM輕柔清洗細胞兩次，并加入20 μL Opti-MEM備用。

3.2 配置ProteanFect轉染體系

• 在40 μL Reagent A中加入0.5 μg EGFP mRNA，充分混勻。
• 往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混勻。

3.3 轉染

• 將上述ProteanFect轉染液加入細胞。
• 37℃培養(yǎng)箱孵育60分鐘。
• 棄轉染液（為避免細胞損失，無需完全棄盡）。
• 加入200 μL完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，24小時后檢測EGFP mRNA表達，48小時后檢測GFP pDNA表達。

04. 轉染檢測